2017 Fiscal Year Research-status Report
Nogo-Bの非アルコール性脂肪肝炎進展における役割とメカニズムの解析
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17K10680
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| Research Institution | Osaka Medical College |
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Principal Investigator |
田代 圭太郎 大阪医科大学, 医学部, 助教 (20645527)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
谷口 高平 大阪医科大学, 医学部, 助教 (70779686)
内山 和久 大阪医科大学, 医学部, 教授 (80232867)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | Nogo-B / Reticulon 4B / NASH / 非アルコール性脂肪肝炎 / CDAHFD |
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| Outline of Annual Research Achievements |
脳卒中易発生高血圧自然発症ラットである SHRSP5/Dmcr ラットを使用した 非アルコール性脂肪肝炎（NASH ）モデルにおいて、高脂肪高コレステロール食(HFC)を与えると早期より高度脂肪肝を発症し、8 週より肝線維化を認めることを確認 した。さらに同モデルでの肝臓における早期より経時的に Nogo-B 発現が明らかに増加していること をウェスタンブロット法や免疫染色を用いて確認した。RT-PCR法で経時的なNogo-B遺伝子の上昇を認め、線維化の指標であるCollagen IやTGF-βの上昇を同様に認めた。脂肪酸合成にかかわる転写因子 SREBP-1cは経時的に上昇を認めたが、脂肪酸の分解に関わるPPARαは差は認めなかった。
また、C57BL/6 マウスにメチオニン減量・コリン欠乏高脂肪食(CDAHFD)を与え NASH モデルを作成し、 肝臓でNogo-B 発現上昇と大滴性脂肪沈着および線維化を確認した。
同時に、大腸癌細胞株のNogo-B遺伝子をノックダウンしたところ、アポトーシスが著明に促進される事を発見し、そのメカニズムを解明した。こちらはサブプロジェクトとして論文をまとめ投稿した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
C57BL/6Jマウスを用いてCDAHFD食を与えてNASHモデルを作成し研究を行ったが、Nogo-Bノックアウトマウスを使用して野生型と比較するには、ノックアウトマウスの元となっている野生型と比較する必要があるため、今回のモデルはノックアウトマウスのコントロールにはならない事が判明した。従って、今回のマウスの実験結果を参考にして今後の実験を進める必要がある。
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| Strategy for Future Research Activity |
本年度8月からYale大学医学部消化器内科Liver Center（Iwakiri Lab)と共同実験を行い、Nogo-Bノックアウトマウスを使用したNASHモデルの作成と解析を進める予定である。
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| Causes of Carryover |
米国におけるノックアウトマウスのBreedingの状況で前倒し請求を行ったが、それ以外はほぼ予定通り遂行できた。
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