膵癌神経浸潤を中心とした癌微小環境における脂質合成・代謝機構の解析

2017 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 17K10694
• Research Institution: Hamamatsu University School of Medicine
• Principal Investigator: 森田 剛文 浜松医科大学, 医学部, 助教 (60464129)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 坂口 孝宣 浜松医科大学, 医学部附属病院, 准教授 (70313955) ; 平出 貴乗 浜松医科大学, 医学部, 特任助教 (70780386)
• Project Period (FY): 2017-04-01 – 2020-03-31
• Keywords: 膵癌 / 神経浸潤 / 脂質 / DRG

Outline of Annual Research Achievements

1日齢の新生児マウスからDRGを採取し、安定して培養することに成功した。マウスDRGの培養上清を回収し、膵癌細胞株（MIA PaCa-2,BxPC-3,Panc-1)に添加した。MIA PaCa-2では細胞増殖が活性化されたが、BxPC-3,Panc-1では細胞増殖に変化を認めなかった。また、MIA PaCa-2では遊走能も亢進することが明らかとなった。マウスDGRと膵癌細胞株を共培養することによって、浸潤能も亢進することが明らかとなった。
マウスDRGの培養上清を膵癌細胞株に添加した状態で脂質を抽出し、LC-MSで脂質分子の変化を網羅的に解析した。主にリン脂質や中性脂肪の分子種毎に変化量を測定し、一定の分子種では増加または減少することが確認された。現在、結果の統計解析を進めている。
また、マウスDRGの培養上清を膵癌細胞株に添加した状態でRNAを抽出し、NGSの解析が出来るようにサンプル調製を行っている。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

科研費申請時点での研究計画書では、平成29年度に①DRGと膵癌細胞株（Miapaca-2、Panc-1）を共培養し、遊走能や浸潤能を解析する。②回収したDRG培養上清添加による膵癌細胞株の増殖能や細胞周期などの変化を解析する予定となっていた。①、②ともに実験を行い、予想された結果が出ているため、順調に進展していると判断している。

Strategy for Future Research Activity

マウスDRGの培養上清を膵癌細胞株に添加した状態で脂質を抽出し、LC-MSで脂質分子の変化を網羅的に解析した。今後、結果の統計解析を進めていく。
マウスDRGの培養上清を膵癌細胞株に添加した状態でRNAを抽出し、NGSの解析が出来るようにサンプル調製を行った。今後、NGSで網羅的な遺伝子解析を行う予定である。