ヘリコバクター属菌感染によるTLR9を介した肝内胆管癌発癌機構の解明

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 17K10703
• Research Institution: Nagasaki University
• Principal Investigator: 足立 智彦 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 講師 (60437879)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 小坂 太一郎 長崎大学, 病院(医学系), 助教 (00437881) ; 江口 晋 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 教授 (80404218) ; 大野 慎一郎 長崎大学, 病院(医学系), 助教 (90567174)
• Project Period (FY): 2017-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: ヘリコバクタービリス

Outline of Annual Research Achievements

【背景・目的】胆道癌は予後不良疾患であり、肝内結石症や膵胆管合流異常はリスク因子として知られている。Helicobacter属菌（H.bilis）は、ヒトでは菌の同定はなされておらずDNA検出のみにとどまっているが、その疫学的検討から胆道発癌との関連が示唆されている。しかし、H.bilisと胆道発癌関連機序の基礎的検討は行われていない。今回H.bilisと胆道発癌の機序を解明すべく下記検討を行った。
【途中経過】ヘリコバクタービリスDNAとの接触実験を行ってきたが望むべくの結果を得られず、購入したヒト不死化胆管上皮細胞（MMNK-1）とH.bilisの共培養での細胞由来の炎症性サイトカインや活性酸素種、細胞増殖活性を非共培養群と比較検討し、サイトカイン活性/活性酸素の上昇/細胞増殖活性を認めたが、一方24時間内でのDNA損傷/DNA修復に差を認めなかった。
【追加実験】In vitroでのヘリコバクターモデルを作成し、生体内での変化を改めて検討した。予備実験として短期モデル作成を行い、胆道のPCRでは Day1：2/3　Day3：2/3 Day7：3/3の生着を確認した一方、鏡検ではbilisの菌体を確認できなかった。48週までの長期モデルも作成し、PCR陽性率は通算でコントロール群の24%に対しモデル群では63%と有意に高値であったが、同様に鏡検では菌体確認できず、また特に胆嚢粘膜の変化を観察したが9％程度の過形成を呈するのみであった。

Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

ヘリコバクタービリスDNAとの接触実験を行ってきたが望むべくの結果を得られず、胆管細胞とヘリコバクタービリス菌体との接触実験とし、前記の結果を得た。さらにin vivoでのモデル作成を試みたが、検鏡でのbilis菌体の確認が行えていない。

Strategy for Future Research Activity

上記のin vitro検討、in vivo検討を各々で論文化する予定とした。

Causes of Carryover

上記研究は施行したものの、進行遅延が生じていたために次年度使用額が生じた。今後は研究結果を学会発表する際の旅費、英文誌投稿に関わる校閲費/投稿費等に使用する予定である。