間葉系幹細胞分泌分子による心臓移植後の新しい免疫寛容誘導の開発

2019 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 17K10728
• Research Institution: Nagoya University
• Principal Investigator: 藤本 和朗 名古屋大学, 医学部附属病院, 病院講師 (70644665)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 碓氷 章彦 名古屋大学, 医学系研究科, 教授 (30283443) ; 大島 英揮 名古屋大学, 医学系研究科, 准教授 (40378188) [Withdrawn] ; 成田 裕司 名古屋大学, 医学部附属病院, 講師 (60378221) ; 緒方 藍歌 名古屋大学, 医学系研究科, 特任助教 (70718311)
• Project Period (FY): 2017-04-01 – 2021-03-31
• Keywords: 心臓移植 / 免疫寛容 / 間葉系幹細胞 / 分泌分子 / エクソソーム

Outline of Annual Research Achievements

現在の移植治療では、同種異系である臓器、細胞を使用するため、拒絶反応が生じる。そのため、この拒絶反応をコントロールするために免疫抑制剤が必要である。近年の免疫抑制剤開発によって、より安全で、より選択的(移植反応の主要なエフェクター細胞はリンパ球T細胞である)な効果の高い免疫抑制が可能となってきた。しかし、現在でもなおその非特異的免疫抑制作用による重症感染症、悪性腫瘍の発生は、解決すべき大きな課題である。研究代表者らは、免疫抑制能・抗炎症作用をもつ間葉系幹細胞(MSC)による抗炎症作用などを介した大動脈瘤治療効果を示してきた。MSCが産生する分泌分子には、抗炎症作用・免疫寛容・ 組織修復を担う因子、エクソソーム(MSC-exo)、progranulin (PGRN), Secretory Leukocyte Peptidase Inhibitor (SLPI)が含まれていることを同定した。これまでのIn vitro検討で、炎症性マクロファージに対してMSC-exoおよびSLPIがより炎症を抑制することが分かった。次にin vivo検討で、異所性心移植モデルに対し MSC-exo またはSLPI を投与し、拒絶反応がどれくらい抑制できるかその効果について検討した。
急性拒絶反応モデルとして 、Brown Norway 雄ラットをドナーとし、Lewis 雄ラットをレシピエントとした。ドナーラットを前胸部開胸し、ヘパリン化(1000U/kg IV)の後、上大静脈と 下大静脈を結紮、大動脈、肺動脈を離断する。左右上下肺静脈は左房で結紮し離断、心臓を 摘出したのち、0°C生食に保存した。レシピエントラットは正中より開腹し、後腹膜を開け下行大動 脈と下大静脈を鈍的に剥離した。ドナー心の大動脈を下行大動脈に、肺動脈を下大静脈に吻合したが、 移植心の再灌流、拍動が確認できなかった。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

急性拒絶反応モデル作成に取り組んだが、良好なモデル確立に時間を要したため、やや遅れていると判断した。

Strategy for Future Research Activity

引き続き急性拒絶反応モデル作成に取り組む。モデルを確立したのち、MSC-exo またはリコンビナントタンパクSLPI を投与し、拒絶反応がどれくらい抑制できるか、その効果について検討する。

Causes of Carryover

予定していた旅費をあまり使用しなかったこと、また、予定していた物品費より少ない金額で実験が遂行できたため。
今後はIn vivo検討を行うため、それにかかる物品費として使用する。また、得られた成果を国内外で発表報告する。