包括的ゲノムプロファイリングに基づくIDH野生型神経膠腫の新規予後因子の機能解明

2018 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 17K10862
• Research Institution: Nagoya University
• Principal Investigator: 本村 和也 名古屋大学, 医学系研究科, 准教授 (30467295)
• Project Period (FY): 2017-04-01 – 2020-03-31
• Keywords: 低悪性度神経膠腫 / IDH1 / 悪性転化

Outline of Annual Research Achievements

本年度は、DMBT1及びMET-shRNA導入されたIDH野生型grade IIIグリオーマ細胞株をマウスの脳内に移植し、その脳腫瘍マウスモデルを用いて脳腫瘍の発生率、増殖の程度及びGFAP, Nestin, S100, NeuN, EGFRvIIIなどの発現を組織学的に検討し、DMBT1及びMETの腫瘍発生、増殖に関わるメカニズムを解明する予定で実験計画を進めてきた。
平成29年度に作成したDMBT1及びMET-shRNA導入ベクター導入grade IIIグリオーマ細胞株を免疫不全マウスの脳に直接移植し、腫瘍の形成、増殖期間およびマウスの生存期間の観察を行ってきた。DMBT1を高発現もしくはMETの機能を抑制することで、生体内における腫瘍細胞の運動能を亢進及び抑制できかどうかを確認してきた。さらに、DMBT1及びMETによる腫瘍発生、増殖に関わるメカニズムを解明することを目的に、脳腫瘍の発生率、増殖の程度及びGFAP, nestin, S100, NeuN, EGFRvIIIなどの発現を組織学的に検討している。次に、DMBT1及びMETこれらの遺伝子の機能を解析するために、これらの細胞を二次移植し、腫瘍の形成能とマウスの生存について解析を行っている。それによって、DMBT1遺伝子導入及びMET遺伝子ノックダウンすることによって、幹細胞様の性質がどのように変化、もしくは保たれているかを評価する。また、腫瘍の生着性やマウスの生存率がどのように変化するかも観察している。これまでにマウスの腫瘍形成過程を、動物用脳MRIにて評価する方法を確立したため、腫瘍形成期にMRIを施行後、脳組織（脳腫瘍検体）を回収し、分子レベルでも評価してきており、現在も実験は進行中である。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

特に大きな問題は生じていないため、計画は順調に進んでいる。

Strategy for Future Research Activity

今後は、IDH野生型grade IIIグリオーマ細胞株腫瘍形成期にMRIを施行後、MET阻害剤を経口投与し、治療終了後にMRIにて評価し、脳組織（脳腫瘍検体）を回収し、効果を分子レベルでも評価する計画である。これまでに肝細胞がんモデルでは、MET阻害剤を行った報告があり、これを参考に投与量を決定し開始する。コントロールマウスも同様に評価し、統計学的な見解からコントロールマウス3匹と治療マウス3匹を計画する予定である。

Causes of Carryover

使用している物品の経費が安く購入することができたため。
その差額を、現在進行しているSCIDマウス作成に充てていきたいと考えている。

Research Products

• [Journal Article] Aberrant Active cis-Regulatory Elements Associated with Downregulation of RET Finger Protein Overcome Chemoresistance in Glioblastoma. (2019)
  • Author(s): Ranjit M, Hirano M, Aoki K, Okuno Y, Ohka F, Yamamichi A, Kato A, Maeda S, Motomura K, Matsuo K, Enomoto A, Ino Y, Todo T, Takahashi M, Wakabayashi T, Kato T, Natsume A.
  • Journal Title: Cell Rep. Volume: 26(9) Pages: 2274-2281
  • DOI: doi: 10.1016/j.celrep.2019.01.109.
• [Journal Article] Validation of a novel molecular RPA classification in glioblastoma (GBM-molRPA) treated with chemoradiation: A multi-institutional collaborative study. (2018)
  • Author(s): Wee CW, Kim IH, Park CK, Kim JW, Dho YS, Ohka F, Aoki K, Motomura K, Natsume A, Kim N, Suh CO, Chang JH, Kim SH, Cho WK, Lim DH, Nam DH, Choi JW, Kim IA, Kim CY, Oh YT, Cho O, Chung WK, Kim SH, Kim E.
  • Journal Title: Radiother Oncol. Volume: 129(2) Pages: 347-351
  • DOI: 10.1016/j.radonc.2018.09.001.
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Immunohistochemical ATRX expression is not a surrogate for 1p19q codeletion. (2018)
  • Author(s): Yamamichi A, Ohka F, Aoki K, Suzuki H, Kato A, Hirano M, Motomura K, Tanahashi K, Chalise L, Maeda S, Wakabayashi T, Kato Y, Natsume A.
  • Journal Title: Brain Tumor Pathol. Volume: 35(2) Pages: 106-113
  • DOI: 10.1007/s10014-018-0312-5.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] A novel high-sensitivity assay to detect a small fraction of mutant IDH1 using droplet digital PCR. (2018)
  • Author(s): Hirano M, Ohka F, Maeda S, Chalise L, Yamamichi A, Aoki K, Kato A, Tanahashi K, Motomura K, Nishimura Y, Hara M, Shinjo K, Kondo Y, Wakabayashi T, Natsume A.
  • Journal Title: Brain Tumor Pathol. Volume: 35(2) Pages: 97-105
  • DOI: 0.1007/s10014-018-0310-7.
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Prognostic relevance of genetic alterations in diffuse lower-grade gliomas. (2018)
  • Author(s): Aoki K, Nakamura H, Suzuki H, Matsuo K, Kataoka K, Shimamura T, Motomura K, Ohka F, Shiina S, Yamamoto T, Nagata Y, Yoshizato T, Mizoguchi M, Abe T, Momii Y, Muragaki Y, Watanabe R, Ito I, Sanada M, Yajima H, Morita N, Takeuchi I, Miyano S, Wakabayashi T, Ogawa S, Natsume A.
  • Journal Title: Neuro Oncol. Volume: 20(1) Pages: 66-77
  • DOI: 10.1093/neuonc/nox132.
  • Peer Reviewed