2019 Fiscal Year Annual Research Report
Function of GAP-43 for axon regeneration after spinal cord injury
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17K10926
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| Research Institution | Niigata University |
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Principal Investigator |
渡邊 慶 新潟大学, 医歯学総合病院, 講師 (40597671)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
五十嵐 道弘 新潟大学, 医歯学系, 教授 (50193173)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 神経軸索再生 / 神経成長タンパク / リン酸化 / リン酸化プロテオミクス |
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| Outline of Annual Research Achievements |
研究の目的：軸索伸長過程において不可欠な役割を果たす成長円錐に着目し、発達期ラット脳由来の成長円錐膜画分の質量分析(リン酸化プロテオミクス解析)を施行し、成長円錐部膜各分にて高頻度に認められたMicrotubule-associated protein 1B(MAP1B)のリン酸化に注目した本研究では、MAP1BのS25とS1201リン酸化と軸索伸長・再生との関連について解析することを目的とした。
研究成果：マウス胎仔大脳皮質初代培養細胞にて、MAP1Bリン酸化は軸索でより高いレベルとなっていることが認められた。胎仔脳の切片にて、リン酸化は軸索が豊富にある構造に特異的に認められ、発生過程での発現過程の変化を確認した。
マウス坐骨神経損傷モデル（圧挫損傷、離断損傷、離断損傷後縫合モデル）を作成し、損傷後組織学的評価を行い、軸索再生マーカーとして既報の抗STMN2 (SCG10) 抗体と比較した。
圧挫損傷モデルで、損傷部でpS25-MAP1BとpS1201-MAP1Bの検出レベル上昇を認め、既報の抗STMN2(SCG10)抗体と同様の変化を認めた。また、離断損傷モデルでは、損傷部遠位側では、リン酸化レベルの上昇を認めなかったが、離断損傷後縫合モデルにおいては、縫合遠位側にもpS1201-MAP1Bの検出レベル上昇を認め、SCG10の発現と同様の変化を認めた。
今回、成長円錐のリン酸化プロテオミクス解析の結果を足掛かりとして、MAP1Bリン酸化部位に対する特異抗体を使用し、染色性を検討した。再生時の神経軸索にてS25, S1201のリン酸化レベルが高く、軸索伸長と再生への関与が示唆された。
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