2017 Fiscal Year Research-status Report
加齢に伴う脊椎変性の進行抑制に関わる因子の分子生物学的研究
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17K10952
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| Research Institution | University of Occupational and Environmental Health, Japan |
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Principal Investigator |
中村 英一郎 産業医科大学, 医学部, 准教授 (10412644)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 椎間板変性 / Hedgehog / Smoothened / 骨棘 / 骨・軟骨代謝学 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
加齢に伴い生じる脊椎・椎間板変性は腰痛や脊柱管狭窄、脊柱変形など脊椎疾患の主な原因と考えられている。しかし、脊椎・椎間板変性過程でどのような因子が関与するのか未解明な部分が多い。そこで髄核に発現するSonic hedgehog（Shh）と椎体終板に発現するIndian hedgehog (Ihh)の双方のHedgehogシグナル伝達に関与する膜蛋白のSmoothened (Smo)を生後に欠失させた(cKO群: Rosa Cre-ER(T);Smof/f)）マウスを作成し、椎間板変性促進モデルにて検討したところ、control群と比べ有意に椎間板変性が抑制される結果を得た。
そこで平成29年度では、変性のメカニズムにHedgehogがどのように関わっているのか組織切片を作成し免疫染色等で検討したところ、control群の変性した椎間板には終板軟骨細胞の肥大化とVEGFならびにCD31の発現がみられたが、cKO群では軟骨細胞の肥大化は有意に抑制されVEGFならびにCD31の発現は見られなかった。
また、Shhのみを生後に欠失させるため、Rosa Cre-ER(T);Shh f/fを交配、作成し同様の椎間板変性モデルにてShhの機能を検討開始した。組織特異的に髄核のみでSmoならびにShhを欠失させた場合にはどうなるのかを確認するため、Shh Cre-ER(T)を購入、繁殖させ、Shh Cre-ER(T);Smo f/fとShh Cre-ER(T);Shh f/fを作成中である。また、SmoのInhibitorや抗体を静注もしくは椎間板内に注入した場合にcKOの結果と同様の結果が得られるのか薬物を購入し実験を開始した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
組織特異的に髄核のみでSmoならびにShhを欠失させた場合にはどうなるのかを確認するため、Shh Cre-ER(T)を購入、繁殖させ、Shh Cre-ER(T);Smo f/fとShh Cre-ER(T);Shh f/fを作成中であるが、やや遅れている。
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| Strategy for Future Research Activity |
Shhのみを生後に欠失させるため、Rosa Cre-ER(T);Shh f/fを交配、作成し同様の椎間板変性モデルにてShhの機能を検討開始した。また、組織特異的に髄核のみでSmoならびにShhを欠失させた場合にはどうなるのかを確認するため、Shh Cre-ER(T)を繁殖させ、Shh Cre-ER(T);Smo f/fとShh Cre-ER(T);Shh f/fを作成中であるので、今後椎間板変性モデルにて検討売る予定である。
また、SmoのInhibitorを静注もしくは椎間板内に注入した場合にcKOの結果と同様の結果が得られるのか薬物を購入し実験を開始した。
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| Causes of Carryover |
購入したマウスが予定より安価だったため、残りを次年度の物品購入等に使用したい。
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