2019 Fiscal Year Annual Research Report
Multimodal therapy by microRNA-encoding oncolytic virus
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17K10970
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| Research Institution | Hiroshima University |
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Principal Investigator |
久保 忠彦 広島大学, 医系科学研究科(医), 准教授 (70397959)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
安達 伸生 広島大学, 医系科学研究科(医), 教授 (30294383)
古田 太輔 広島大学, 病院(医), 助教 (30781645)
坂口 剛正 広島大学, 医系科学研究科(医), 教授 (70196070)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 骨肉腫 / 腫瘍溶解性ウイルス / マイクロRNA |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ヒトmicroRNA-34a,microRNA-29a,microRNA-143 cDNAをVSVゲノムDNA (pVSV-NX2, NC001560) に大腸菌を用いて挿入し、全長のDNAプラスミドを作成した。これをヘルパープラスミドであるpIRES-L, pIRES-N, pIRES-Pと共にT7 RNA polymeraseを発現するHamster腎由来BHK細胞に導入して、組換えウイルスを作成した。
各種力価のVSV-microRNA-34a,microRNA-29a,microRNA-143をヒト由来培養骨肉腫細胞、マウス由来培養骨肉腫細胞 (LM8) に感染させてmicroRNA発現量を測定したところ経時的に各々microRNA発現増幅を認めた。さらに、各種力価のVSV-microRNAを各種骨肉腫細胞に感染させて細胞増殖能 (MTT assay)、細胞浸潤・細胞遊走能 (Cell Invasion Migration Assay) を行ったところ、VSV-microRNA-143において、5×10-4 MOIでの投与時はVSV投与群と比較して有意に強い細胞毒性を認め、遊走能についても有意な抑制を示した。結論として、Tumor suppressor microRNAを組み込んだVSVは一部の用量では抗腫瘍効果が増強するものの、その用量の幅はせまく、Tumor-suppressor microRNA組み込みによる相乗効果は、大きくはなかったものの、ある程度の相乗効果を示した。
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Research Products
(3 results)
