2017 Fiscal Year Research-status Report
活性型ビタミンD3誘導体:エルデカルシトールの永久軟骨細胞に対する作用機序の解明
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17K11024
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| Research Institution | Osaka City University |
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Principal Investigator |
大田 陽一 大阪市立大学, 大学院医学研究科, 講師 (50633484)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
洲鎌 亮 大阪市立大学, 大学院医学研究科, 病院講師 (00779457)
箕田 行秀 大阪市立大学, 大学院医学研究科, 講師 (90453133)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 活性型ビタミンD3誘導体 / 永久軟骨細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、活性型ビタミンD3 誘導体（エルデカルシトール）の軟骨細胞、特に永久軟骨細胞に対する作用機序の解明を行うことにより、その関節軟骨変性予防効果に関するメカニズムを追及することを目的とする。本年度ではこれまでに行ってきたマウス変形性関節症誘導モデルを用いた、活性型ビタミンD3 誘導体の関節軟骨変性に及ぼす影響を引き続き検討を重ねた結果、活性型ビタミンD3誘導体の局所関節内投与により、早期における関節軟骨変性予防効果を解明し論文発表(Biochem Biophys Res Commun. 2018 ;495(1):179-184.)を行った。組織免疫染色の結果、活性型ビタミンD3誘導体投与により関節軟骨表層における、転写因子ErgやLubricinの発現が増強されたことから、活性型ビタミンD3誘導体の関節軟骨変性予防効果は永久軟骨細胞である関節軟骨表層細胞をターゲットとしていることが考えられるため、さらにin vitroにおける研究をすすめている。生後3-5日のマウス骨端部の軟骨細胞を単離した後、fibronectinのaffinityの相違によりソーティングを行い、表層細胞(surface layer cell)とその深層にある成長軟骨細胞に分離することに成功した。分離した表層軟骨細胞に活性型ビタミンD3誘導体（1α,25-dihydroxy-2β-(3-hydroxypropoxy) vitamin D3）;濃度：10-8 M添加後5日のRNAを回収しtype10コラーゲンの発現について検索した結果、活性型ビタミンD3誘導体非投与細胞と比較してその発現量は低下する傾向にあった。今後活性型ビタミンD3誘導体の濃度としては10-8 Mを中心に研究を進めていく予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
マウス変形性関節症誘導モデルを用いたin vivo研究から、軟骨変性早期において、活性型ビタミンD3誘導体は関節軟骨表層に影響を与えていることが考えられたが、in vitroにおける関節軟骨表層細胞分化に対する活性型ビタミンD3誘導体の培養条件等の検索が当初の予定よりやや遅れていると考えている。
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| Strategy for Future Research Activity |
関節軟骨表層細胞分化に対する活性型ビタミンD3誘導体の効果について関節マーカーを中心としてさらに検討を行う。今後はそれら条件をもとに活性型ビタミンD3誘導体投与下培養を行った関節軟骨表層細胞（永久軟骨細胞）を一塊としてヌードマウスの皮下に細胞移植し、形成されたペレットを組織学的に解析するin vivo研究を進めていく予定である。
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| Causes of Carryover |
（理由）本年度に予定していた、活性型ビタミンD3誘導体による関節軟骨表層細胞分化に対するin vitroの実験が遅れていたため、その実験に必要な備品、消耗品等の購入をしていなかったため。
（使用計画）関節軟骨表層細胞の細胞移植実験に必要な備品、消耗品や組織学的研究に必要な試薬、抗体等、実験動物としてヌードマウスの購入に使用する。また、生後3-5日のマウス骨端部の軟骨細胞の単離を行うため、実験動物としてC57BL/6J妊娠マウスやの購入にも使用する予定である。
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Research Products
(6 results)
