2018 Fiscal Year Research-status Report
精巣生殖細胞におけるNotchシグナリング制御機構の解明とその臨床応用
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17K11198
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
宮川 康 大阪大学, 医学系研究科, 招へい准教授 (70362704)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
田中 宏光 長崎国際大学, 薬学部, 准教授 (10263310)
福原 慎一郎 大阪大学, 医学系研究科, 講師 (20609870)
木内 寛 大阪大学, 医学系研究科, 講師 (70403053)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 男性不妊 / 無精子症 / 遺伝子 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
非閉塞性無精子症（NOA）はその精巣病理組織所見からセルトリセルオンリー症候群（SCOS）、成熟停止（MA）そして精子低形成（HS）の大きく3病型に分類される。HSは加齢や環境因子などによる二次的変化と推測され、多くは精巣内精子採取術で治療可能であるが、SCOSやMAは、大部分が原因不明であり、精子採取も困難である。我々は、精巣生殖細胞を特異的に認識するモノクローナル抗体TRA98の抗原がNotchシグナリング制御遺伝子NKAP(NFkB activating protein)であることを世界に先駆けて同定し、減数分裂後に機能するホモログ遺伝子NKAPL（NKAP-like）をも新規に発見した。驚くべきことにNKAPとNKAPLの遺伝子破壊マウスの精巣表現型はそれぞれSCOSとMAであった。2つの遺伝子の生殖細胞のNotchシグナリングの制御機構を明らかにし、NOAの病態解明を実施している。
Cre/loxPシステムを用い雄性生殖細胞特異的なNKAP破壊マウスの作成に成功し、その表現型はSCOSであり、そのKOマウスの解析を行い、NKAPの生殖細胞における機能を明らかにし、論文投稿中である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
１）NKAP/NKAPLの生殖細胞での共役因子ならびに標的遺伝子の解析
我々は20000種類以上のヒト遺伝子ORFをGateway systemに組み込みcell free protein synthesisにより独自に作成したprotein arrayを用いて、NKAP/NKAPLリ
コンビナント蛋白と反応する共役因子のスクリーニングを行い、その候補を同定した。現在機能解析中である。
２）成熟停止による非閉塞性無精子症患者のNKAPLのゲノム変異・SNP解析
サンプル50症例についてエクソンシークエンス解析を終了した。スーパーコンピューターによる変異検出を施行したが、有意な変異やＳＮＰは見出せなかった。、現在発現制御異常の可能性につきさらに解析を進めている。
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| Strategy for Future Research Activity |
これまでに判明したNKAP/NKAPLの生殖細胞における機能解析結果については、すでに論文作成をして投稿中であり、今後は計画通りに更に関連分子につき機能解析すすめるとともに、成熟停止症例をさらに集積しゲノム解析する。
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| Causes of Carryover |
次年度執行予定の試薬が予想以上に高額だったため、今年度予算を抑えた。繰越金で購入予定の試薬を購入する。
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Research Products
(3 results)
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[Journal Article] Adipocyte GR Inhibits Healthy Adipose Expansion Through Multiple Mechanisms in Cushing Syndrome.2018
Author(s)
Hayashi R, Okuno Y, Mukai K, Kitamura T, Hayakawa T, Onodera T, Murata M, Fukuhara A, Imamura R, Miyagawa Y, Nonomura N, Otsuki M, Shimomura I.
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Journal Title
Endocrinology
Volume: 160
Pages: 504-521
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Intravesical ATP instillation induces urinary frequency because of activation of bladder afferent nerves without inflammatory changes in mice: A promising model for overactive bladder.2018
Author(s)
Ueda N, Kondo M, Takezawa K, Kiuchi H, Sekii Y, Inagaki Y, Soda T, Fukuhara S, Fujita K, Uemura M, Imamura R, Miyagawa Y, Nonomura N, Shimada S.
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Journal Title
Biochem Biophys Res Commun
Volume: 506
Pages: 498-503
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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