2017 Fiscal Year Research-status Report
骨髄由来免疫抑制細胞と卵巣癌幹細胞による癌免疫逃避機構の解明とその克服
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17K11276
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
馬淵 誠士 大阪大学, 医学系研究科, 助教 (00452441)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
澤田 健二郎 大阪大学, 医学系研究科, 講師 (00452392)
橋本 香映 大阪大学, 医学系研究科, 助教 (90612078)
松本 有里 大阪大学, 医学部附属病院, 助教 (90756488)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | MDSC / 癌幹細胞 / 治療抵抗性 / PD-L1 / 抗腫瘍免疫 / 免疫寛容 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
我々は、「卵巣癌において、MDSCが癌幹細胞化を促進し、MDSCと癌幹細胞が協調しながら免疫寛容を誘導し、免疫チェックポイント阻害薬に抵抗性を示す」と考え、これを証明すべく研究を行ってきた。平成29年度の研究として、研究【1】：ヒト卵巣癌検体におけるMDSC数と、癌幹細胞数、治療抵抗性の関係、研究【2】：MDSCが癌幹細胞化を促すメカニズム、研究【3】癌幹細胞による抗腫瘍免疫の抑制機構の3つを明らかにする計画を立て、最も時間を要する研究から【2】→【3】→【1】の順で研究を進めることとした。まず我々は、研究【2】として、研究マウス卵巣癌細胞とMDSCをIn vitroで共培養し（共培養しない場合も設定）、共培養によって癌幹細胞(ALDH-High細胞)が増加するかをALDEFLUOR assayで検討した。その結果、MDSCとの共培養でALDH-Highの癌細胞が増加することが確認できた。次にヒト卵巣癌細胞とMDSCを共培養し同様の実験を行い、同様にALDH-Highの癌細胞が増加することを確認した。そこでALDH-Highの細胞をソーティングし癌幹細胞性との生物学的特性を検討したところ、これらの細胞が癌幹細胞の特徴（自己複製能・分化能・造腫瘍能・治療抵抗性）を有することが示された。MDSCが癌幹細胞化を促進することが示された訳である。続いて研究【3】として、MDSCにより誘導された癌幹細胞がPD-L1を過剰発現し、MDSCと協調して抗腫瘍免疫を抑制すると仮定し、ALDH-High の癌幹細胞とALDH-Lowの非癌幹細胞を分離抽出しPD-L1の発現を比較したところ、癌幹細胞でPD-L1の発現が亢進していることが確認できた。これらの事実は、MDSC何らかの因子を放出し、癌幹細胞化を促進し治療抵抗性に寄与するとともに、抗腫瘍免疫にも影響を及ぼしている可能性を示唆する結果と解釈できる。現在、MDSCの癌幹細胞誘導効果をIn vivoで検証するとともに、MDSCが放出する癌幹細胞化に関わる液性因子の同定を目指した検討を行っている段階である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
MDSCが癌幹細胞化を促進すること、またMDSCによって誘導された癌幹細胞がPD-L1を強発現していることが確認できた。これらは、本研究の仮説の証明を行う中で最も重要な部分であり、この証明に最も時間を要すると考えていた。研究【1】の「ヒト卵巣癌検体におけるMDSC数と、癌幹細胞数、治療抵抗性の関係」は検討できていないが、既に検体の収集は済ませており、比較的近い将来、結果が得られると考えている。以上より、研究は概ね計画通り進行していると判断した。
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| Strategy for Future Research Activity |
平成30年度は、まず、平成29年度に行えなかった研究【1】の「ヒト卵巣癌検体におけるMDSC数と、癌幹細胞数、治療抵抗性の関係」を行う予定である。既に当院産婦人科で手術された卵巣癌の検体をストックしており、これらを抗ALDH抗体（癌幹細胞を反映）および抗CD33抗体（MDSCを反映）で免疫組織染色する。染色結果を基に、腫瘍中の癌幹細胞、MDSC数と、患者の化学療法感受性（奏効率・生存期間）との関係を単変量・多変量解析にて検討する予定である。患者の臨床Dataの収集も済ませており、比較的短期間の内に結果が得られると考えている。続いて、研究【4】として「癌幹細胞によるMDSCの制御機構についての検討」についての検討を行う予定である。この研究では、癌細胞をMDSCと共培養した際に、癌細胞から放出される蛋白を抽出したのち、プロテインアレイを実施し、「癌細胞から分泌され、MDSCを活性化させる因子」を同定したいと考えている。
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