2019 Fiscal Year Annual Research Report
Novel therapeutic strategy for ovarian cancer targeting immune tolerance-inducing molecules, PD-L1 and IDO, using genome editing technique
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17K11293
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| Research Institution | Wakayama Medical University |
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Principal Investigator |
井箟 一彦 和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (60303640)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
近藤 稔和 和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (70251923)
馬淵 泰士 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (80382357)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 免疫寛容 / PD-L1 / ゲノム編集 / 卵巣癌 / 免疫療法 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
マウス卵巣癌細胞株であるID8のPD-L1遺伝子欠損細胞株 (PD-L1-KO ID8)をCRISPR/Cas9 systemを用いて前年度までに樹立している。これを用いてPD-L1-KO ID8およびControl ID8をC57BL/6マウスに腹腔内移植後、腫瘍増殖能と生存期間を比較検討し、腫瘍内の免疫環境について分子・病理学的に比較検討した。PD-L1-KO ID8移植マウスはControl ID8移植マウスと比較して、生存期間が有意に延長した。加えてPD-L1-KO ID8移植マウスはControl ID8移植マウスと比較して、腹腔内移植後70日目の播種腫瘍重量および腹水量が有意に減少した。また免疫組織化学的検討では、PD-L1-KO ID8移植マウスにおいて、Control ID8移植マウスと比べて、腫瘍内のCD4+ T細胞、CD8+ T細胞、NK細胞、およびM1マクロファージの数は有意に増加し、一方でFoxp3+ Treg細胞、M2マクロファージの数は有意に減少していた。さらにPD-L1-KO ID8移植マウスではControlマウスと比較して、腫瘍内のIFN-γ、TNF-α、IL-2、IL-12a、CXCL9、CXCL10のmRNA発現は有意に増加し、一方IL-10、CXCL1、CXCL2のmRNAの発現は有意に減少していた。ゲノム編集技術を用いて、腫瘍細胞上のPD-L1遺伝子を完全に欠損させることで、腫瘍微小環境において、CD4+、CD8+ T細胞、NK細胞およびM1マクロファージが増加し、一方Treg細胞が減少し、さらに種々のサイトカイン・ケモカインが調節されることで抗腫瘍免疫が促進され、腫瘍増殖が抑制されることが示された。これらの結果によりPD-L1を標的とする治療新規免疫療法が卵巣癌の新たな治療戦略となり得る可能性が示唆された。
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