HPV関連癌に対する新規樹状細胞ワクチン治療の有効性の検証

2017 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 17K11392
• Research Institution: University of the Ryukyus
• Principal Investigator: 上原 貴行 琉球大学, 医学部附属病院, 助教 (00644402)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 池上 太郎 琉球大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (00754409) ; 近藤 俊輔 琉球大学, 医学部附属病院, 医員 (90596363)
• Project Period (FY): 2017-04-01 – 2020-03-31
• Keywords: ヒト乳頭腫ウイルス / 樹状細胞ワクチン治療 / 細胞障害性T細胞

Outline of Annual Research Achievements

我々は、近年注目されているヒトパピローマウイルス(HPV)関連頭頸部癌に対する新たな治療戦略として樹状細胞（Dendritic cell; 以下DC）免疫ワクチン治療の開発を目的とした研究を行っている。抗原特異的なDCワクチンを作製するために、細胞性免疫応答（主として細胞障害性Tリンパ球；CTLによる）を規定する重要な因子であるヒト適合抗原（以下HLA）として日本人に最多のHLA A*2402陽性者を対象に、適合する血液ドナーを探索し、現在まで目的とする適合者として健常ボランティア2例(全7例中)を抽出した。In vitro下のDCワクチンの作製方法として、Miltenyi社の磁気ビーズを用いたPositive selection法により、CD14陽性細胞およびCD8陽性細胞（CTL分画）の分離を行い、CD14陽性細胞においては、IL-4/GM-CSFやその他各種サイトカイン(TNFα,IL-1β,IL-6,PGE2)を用いて維持培養しDCへの分化・成熟化を誘導した。また、Jangらが報告したHPVE6,E7蛋白のうちHLA A24拘束性を有するペプチド（計6種）を合成し、これを各々DCに曝露することで抗原特異的DCワクチンを作製した。本DCワクチンを当科にて所有しているHLA A*2402陽性頭頸部癌細胞株（HSC4細胞）にCTLとともに混合培養し、Cytotoxic assayを用いた細胞障害性試験での解析を行っている。また、CTL活性を増強すべく、PD-L1抗体試薬での処置を追加し細胞障害試験での有用性を検討する予定である。今後これらをin vivoや臨床研究へ継続していくことを目的としている。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

細胞障害試験での有効性確認について複数回の実験を行っているが、有意な効果が立証されておらず、サイトカインや腫瘍：癌細胞株の細胞数割合などの条件検討を加えながら検討を行っている。そのため、研究進行はやや停滞・遅れが生じている。上記につき有効性を立証すべく検討を継続していく

Strategy for Future Research Activity

今後は現行の細胞障害試験において有意な抗腫瘍効果が確認されうるかを実験回数を重ねて解析検討する。併せて上記のPD-L1阻害薬の使用による上乗せ効果を検証し、少なくともin vitro assayでの有意な有効性につき結果を得ることを目標とする。

Causes of Carryover

主として研究備品、試薬などの経費として使用。残高はH30年度の必要経費に加えて研究費に計上する予定です。