2017 Fiscal Year Research-status Report
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17K11470
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| Research Institution | Kanazawa Medical University |
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Principal Investigator |
久保 江理 金沢医科大学, 医学部, 教授 (10262619)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 眼細胞生物 / 白内障 / Peroxiredoxin 6 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
代表者の研究室で保有するマウスLEC (MLEC), SCRより分離した培養LEC (SCR-LEC）, 白内障を有しないラットLEC (RLEC)を用い, SUMO化抑制PRDX6とラノステロールの影響を検討する。培養LECに対しH2O2添加による酸化ストレスを与え,各種濃度のTAT-PRDX6, SUMO化抑制TAT-PRDX6, ラノステロールと陰性コントロールのMut-PRDX6, ジヒドロコレステロールを添加し, 細胞生存率をMTSアッセイで測定した。その結果、H2O2添加によるLECの細胞生存率の低下は、TAT-PRDX6, SUMO化抑制PRDX6のみ有意に抑制されていたが、ラノステロールには細胞死抑制効果は認めなかった。SUMO化抑制PRDX6は、TAT-PRDX6より細胞死抑制効果が高かった。
Shumiya Cartaract Rat (SCR)の白内障を有する個体( Cat+)と、発症しない個体(Cat-)において、水晶体を摘出し蛋白を可溶性画分と不溶性画分抽出に分離した。その後、ウェスタンブロットを一次抗体にαBクリスタリン抗体を用いて行った。その結果、SCR Cat+水晶体においては、αBクリスタリンの不溶化が有意に高く認められ、凝集、不溶化という変化がSCRでは明らかであった。
SCRの白内障を有するLEC(Cat+ LEC)と有しないLEC(Cat-LEC)を摘出する。摘出したサンプルからTotal RNAを抽出し、ラベリングを行った。今後, Affymetrix- GeneChip Arrayを用いて, 網羅的な遺伝子発現変化の解析を現在施行中である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
SCRラットの個体の数をそろえ、培養細胞の樹立に時間がかかったため、やや研究の開始が遅れたが、次年度で遂行可能である。
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| Strategy for Future Research Activity |
平成29年度の研究計画である、DNAマイクロアレイ法を用いた網羅的な遺伝子発現解析の結果が出るため、その分析と確認作業を今後行う。また、予定通り平成30年度の研究計画を施行する。
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| Causes of Carryover |
研究が遅れ気味なので、次年度に薬品購入するため。
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