救命困難な超重症NECに対する大建中湯を用いた実験的予防法開発

2018 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 17K11515
• Research Institution: Kagoshima University
• Principal Investigator: 桝屋 隆太 鹿児島大学, 附属病院, 特任助教 (90448572)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 家入 里志 鹿児島大学, 医歯学域医学系, 教授 (00363359) ; 大西 峻 鹿児島大学, 附属病院, 医員 (10614638) ; 川野 孝文 鹿児島大学, 医歯学総合研究科, 客員研究員 (40457651) [Withdrawn] ; 加治 建 鹿児島大学, 附属病院, 特任教授 (50315420) ; 武藤 充 鹿児島大学, 医歯学総合研究科, 客員研究員 (70404522) ; 中目 和彦 鹿児島大学, 医歯学域附属病院, 講師 (70448570) ; 町頭 成郎 鹿児島大学, 医歯学域附属病院, 助教 (80404523) ; 矢野 圭輔 鹿児島大学, 附属病院, 特任助教 (30757919)
• Project Period (FY): 2017-04-01 – 2020-03-31
• Keywords: 重症新生児壊死性腸炎 / モデルラット / 大建中湯 / 新生児壊死性腸炎スコアリング

Outline of Annual Research Achievements

・大建中湯投与による新生児壊死性腸炎予防効果の検討
新生仔ラットを用いた低酸素刺激による新生児壊死性腸炎動物モデル作成の手法に関しては、すでに当研究グループにおいて確立されていた。平成29年度にはこのモデルに対して、従来の低酸素刺激の回数を増加し、さらに寒冷刺激を追加変更した。このモデルラットの腸管を新生児壊死性腸炎スコアリングで病理組織学的に半定量的評価を行ったところ、従来のモデルと比較して重症化していることが確認された。この重症モデルを用いて、ヒトに対する大建中湯の標準投与量をもとに最も効果的な投与経路と投与量を決定した上で、大建中湯投与量別に4群に分類を行い、大建中湯の投与を行った。
平成30年度は、大建中湯を投与したモデルラットにおける実際の重症新生児壊死性腸炎の予防効果について病理組織学的評価を行った。
すなわち、犠死せしめたモデルから摘出した消化管組織をホルマリン固定、パラフィン包埋、薄切、HE染色して標本を作製し鏡検した上で、新生児壊死性腸炎スコアリングを用いて病理組織学的に半定量的評価を行って投与量別の群間比較を行い、大建中湯投与による新生児壊死性腸炎予防効果を評価した。
今後は、大建中湯の新生児壊死性腸炎予防効果のメカニズムについて、摘出した消化管組織内のサイトカインおよび核内蛋白、血中の酸化ストレスマーカーや凝固系マーカーを定量的に評価し群間で比較を行うことによって検討する予定である。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

・大建中湯投与による予防効果の検討
予防効果の判定を主に組織学的によりスコア化して行った。
大建中湯を投与した重症新生児壊死性腸炎モデルラットを犠死後、腸管を摘出し、回盲弁から1cm近位側の回腸を採取した。ホルマリンおよびエタノールで固定し、パラフィン包埋、4-6μmで切片を作製した。
ヘマトキシリン・エオジンで染色して、組織学的変化を新生児壊死性腸炎スコアリングを用いて半定量的に評価を行い、大建中湯投与量別にグループ化した各群間で比較検討を行うことによって、大建中湯投与による予防効果の判定を行った。

Strategy for Future Research Activity

3年目は重症新生児壊死性腸炎モデルラットに対する大建中湯の予防効果のメカニズムについてサイトカイン、核内蛋白レベルにて検討を加える。炎症・凝固反応の面から検討するため、ELISA法を用いて腸管組織内腸管組織内のサイトカインの網羅的解析を行い、サイトカインシグナル伝達を解明する予定である。

Research Products

• [Journal Article] A Randomized Trial to Compare the Conventional Three-Port Laparoscopic Appendectomy Procedure to Single-Incision and One-Puncture Procedure That Was Safe and Feasible, Even for Surgeons in Training (2019)
  • Author(s): Moriguchi Tomoe、Machigashira Seiro、Sugita Koshiro、Kawano Masato、Yano Keisuke、Onishi Shun、Yamada Koji、Yamada Waka、Masuya Ryuta、Kawano Takafumi、Nakame Kazuhiko、Mukai Motoi、Kaji Tatsuru、Ieiri Satoshi
  • Journal Title: Journal of Laparoendoscopic & Advanced Surgical Techniques Volume: 29 Pages: 392～395
  • DOI: https://doi.org/10.1089/lap.2018.0195
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] The long-term health-related quality of life in patients operated for choledochal cyst (2019)
  • Author(s): Baba Tokuro、Mukai Motoi、Masuya Ryuta、Kawano Masato、Yano Keisuke、Murakami Masakazu、Onishi Shun、Yamada Koji、Yamada Waka、Kawano Takafumi、Machigashira Seiro、Nakame Kazuhiko、Kaji Tatsuru、Ieiri Satoshi
  • Journal Title: Pediatric Surgery International Volume: 35 Pages: 539～546
  • DOI: https://doi.org/10.1007/s00383-019-04456-7
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Predictive factors affecting the prognosis and late complications of 73 consecutive cases of esophageal atresia at 2 centers (2018)
  • Author(s): Masuya Ryuta、Kaji Tatsuru、Mukai Motoi、Nakame Kazuhiko、Kawano Takafumi、Machigashira Seiro、Yamada Waka、Yamada Koji、Onishi Shun、Yano Keisuke、Moriguchi Tomoe、Sugita Koshiro、Kawano Masato、Noguchi Hiroyuki、Suzuhigashi Masaya、Muto Mitsuru、Ieiri Satoshi
  • Journal Title: Pediatric Surgery International Volume: 34 Pages: 1027～1033
  • DOI: doi: 10.1007/s00383-018-4326-1
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] 胆道閉鎖症葛西手術術後患者における自己肝生存率に対する予後因子の検討 (2018)
  • Author(s): 桝屋 隆太、家入 里志、連 利博、中目 和彦、川野 孝文、春松 敏夫、山田 和歌、町頭 成郎、向井 基、加治 建
  • Journal Title: 日本小児外科学会雑誌 Volume: 54 Pages: 1324～1331
  • DOI: doi.org/10.11164/jjsps.54.7_1324
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] GvHD仮説からみた成因と発症時期 (2018)
  • Author(s): 連 利博, 桝屋隆太, 向井 基、家入里志
  • Journal Title: 小児外科 Volume: 50 Pages: 16 - 20
• [Journal Article] The effect of intravenous lipid emulsions and mucosal adaptation following massive bowel resection (2018)
  • Author(s): Onishi Shun、Kaji Tatsuru、Machigashira Seiro、Yamada Waka、Masuya Ryuta、Nakame Kazuhiko、Kawano Masato、Yano Keisuke、Yamada Koji、Kawano Takafumi、Mukai Motoi、Yoshioka Takako、Tanimoto Akihide、Ieiri Satoshi
  • Journal Title: Journal of Pediatric Surgery Volume: 53 Pages: 2444～2448
  • DOI: https://doi.org/10.1016/j.jpedsurg.2018.08.019
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Ghrelin stimulates intestinal adaptation following massive small bowel resection in parenterally fed rats (2018)
  • Author(s): Onishi Shun、Kaji Tatsuru、Yamada Waka、Nakame Kazuhiko、Machigashira Seiro、Kawano Masato、Yano Keisuke、Harumatsu Toshio、Yamada Koji、Masuya Ryuta、Kawano Takafumi、Mukai Motoi、Hamada Taiji、Souda Masakazu、Yoshioka Takako、Tanimoto Akihide、Ieiri Satoshi
  • Journal Title: Peptides Volume: 106 Pages: 59～67
  • DOI: https://doi.org/10.1016/j.peptides.2018.06.009
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Long-term outcomes of surgery for choledochal cysts: a single-institution study focusing on follow-up and late complications (2018)
  • Author(s): Mukai Motoi、Kaji Tatsuru、Masuya Ryuta、Yamada Koji、Sugita Koshiro、Moriguchi Tomoe、Onishi Shun、Yamada Waka、Kawano Takafumi、Machigashira Seiro、Nakame Kazuhiko、Takamatsu Hideo、Ieiri Satoshi
  • Journal Title: Surgery Today Volume: 48 Pages: 835～840
  • DOI: https://doi.org/10.1007/s00595-018-1660-9
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Presentation] Morphometrical analyses on the narrowing of portal veins and thickening of media of hepatic arteries in the liver of biliary atresia. (2018)
  • Author(s): Masuya R, Muraji T, Ohtani H, Mukai M, Onishi S, Harumatsu T, Yamada K, Yamada W, Kawano T, Machigashira S, Nakame K, Kaji T, Ieiri S
  • Organizer: The 25th Congress of the Asian Association of Pediatric Surgeons
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] The physical growth and social prognosis of esophageal atresia patients who reach 15 years of age or older: The long-term outcomes at a single institution (2018)
  • Author(s): Masuya R, Kaji T, Murakami M, Yano K, Baba T, Harumatsu T, Onishi S, Yamada K, Yamada W, Kawano T, Machigashira S, Mukai M, Nakame K, Mukai M, Ieiri S
  • Organizer: The 25th Congress of the Asian Association of Pediatric Surgeons
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] 定量的PCRを用いた母親由来キメラ細胞の定量および母児間混合リンパ球培養との比較検討を行った胆道閉鎖症患児の1例 (2018)
  • Author(s): 桝屋隆太, 連 利博, 矢野圭輔, 大西 峻, 山田耕嗣, 山田和歌, 川野孝文, 中目和彦,向井 基, 加治 建, Sami B Kanaan, J Lee Nelson, 家入里志
  • Organizer: 第45回日本胆道閉鎖症研究会
• [Presentation] 胆道閉鎖症の葛西手術時肝生検検体における門脈枝および肝動脈枝の形態計測学的検討 (2018)
  • Author(s): 桝屋隆太, 連 利博, 大谷明夫, 矢野圭輔, 大西 峻, 山田耕嗣, 山田和歌, 川野孝文,中目和彦, 向井 基, 加治 建, 家入里志
  • Organizer: 第45回日本胆道閉鎖症研究会
• [Presentation] Morphometrical analyses on narrowing of portal veins and thickening of hepatic arteries in liver of biliary atresia. (2018)
  • Author(s): Masuya R, Muraji T, Ohtani H, Mukai M, Yano K, Kawano M, Onishi S, Yamada K, Yamada W, Kawano T, Machigashira S, Nakame K, Kaji T, Ieiri S
  • Organizer: The 51st Annual Scientific Meeting of the Pacific Association of Pediatric Surgeons 2018
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] 15歳以上に到達した先天性食道閉鎖症術後患者に対する身体的・社会的長期予後の解析 (2018)
  • Author(s): 桝屋隆太, 加治 建, 矢野圭輔, 大西 峻, 山田耕嗣, 山田和歌, 川野孝文, 町頭成郎, 中目和彦, 向井 基, 家入里志
  • Organizer: 第55回日本小児外科学会学術集会