2018 Fiscal Year Research-status Report
蛍光タンパクを用いた革新的カップリング・モノマー可視化技術の開発
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17K11749
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
西川 悟郎 岡山大学, 大学病院, 講師 (00172635)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
長岡 紀幸 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 助教 (70304326)
丸尾 幸憲 岡山大学, 大学病院, 講師 (60314697)
入江 正郎 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 非常勤研究員 (90105594)
皆木 省吾 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 教授 (80190693)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | サンドブラスト / レジンセメント / シランカップリング剤 / 蛍光タンパク / 蛍光顕微鏡 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
サンドブラスト処理後の歯科用修復物表面に付着する微量のサンドブラスト粒子は単なる汚染物質とみなされ，臨床においても，あるいは研究室の実験手順においても，通常は蒸留水などによる超音波洗浄で除去される．申請者らはこの超音波洗浄処理が修復物に対するレジンセメントの接着強さを減少させる現象を報告した(Nishigawa G et.al, PLoS ONE, 2016)．しかしながら，この洗浄処理が接着強さを減少させる原因は未だに明らかではない．本研究は，これらの原因を明らかにするため，蛍光タンパクを用いた革新的なカップリング・モノマー可視化技術を開発し，その技術を用いて，超音波洗浄による接着力低下の原因が，サンドブラスト処理による材料表面の物理的な新鮮面露出(化学的清浄化)とそれに続く蒸留水を用いた超音波洗浄浄による新鮮面への汚染であることを，材料表面のカップリング・モノマー吸着量分析から証明することを目的とする．
30年度は，被験樹脂であるCAD/CAM冠に用いられるレジンブロック表面を，選定した蛍光顕微鏡を用いて観察し．顕微鏡による色調調整などの観察条件の設定を行った．
さらに本研究の目指す，接着効果の臨床効果の向上を検討するために，サンドブラスト処理とカップリング・モノマー処理を行った被験レジンブロックとレジンセメントの合着界面を機械加工によって観察可能な断面形成を施し，SEMおよびSTEM観察を行うことによって，レジンブロック中のフィラーに対するサンドブラストによる割断面の獲得状態などを視覚的に観察することによって検討を加えた．
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
蛍光顕微鏡の使用が可能となり，その操作方法を習得し試料観察するうえでの設定条件の検討を行うことができた．
さらに接着効果の臨床効果の向上を検討するために，サンドブラスト処理とカップリング・モノマー処理を行った被験レジンブロックとレジンセメントの合着界面を機械加工によって観察可能な断面形成を施し，電界放出走査電子顕微鏡（SEM）およびエネルギー分散型X線分析装置（EDS）を備えた走査型透過電子顕微鏡（STEM）JEM-2100F（日本電子）で観察および分析を行った．この結果は令和元年度に学会発表（日本補綴歯科学会，札幌）を行うことが決まった．
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| Strategy for Future Research Activity |
被験レジンブロック上へ付着したカップリング・モノマーの視覚的観察と定量的分析を可能とするために，カップリング・モノマーに付着させた蛍光タンパクを蛍光顕微鏡を利用して観察できるように，操作と設定の調整を行う．
その方法を確立させたうえで，サンドブラストした被験材料表面を超音波洗浄した場合としなかった場合，それぞれの状態の表面いカップリング・モノマーを付着させ，さらにその付着したカップリング・モノマーに蛍光タンパクを結合させる．その表面を蛍光顕微鏡で観察することによって，超音波洗浄の有無によるカップリング・モノマーの材料表面への付着状態の違いを検討する．
さらに，超音波洗浄の有無がカップリング・モノマーを付着させた被験レジンブロックとレジンセメントとの間の接着強さの計測を行う．
これらの蛍光顕微鏡による観察技法，SESTEM観察，および接着強さの計測結果を併せて検討することによって，超音波洗浄によるカップリング・モノマー付着効果およびレジンセメントの接着強さへの影響を総合的に検討する予定である．
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Research Products
(5 results)
