2019 Fiscal Year Research-status Report
骨形成と血管石灰化に関与するmicroRNAの解析と標的遺伝子の同定
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17K11967
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Research Institution | Kyushu Dental College |
Principal Investigator |
藤田 優子 九州歯科大学, 歯学部, 助教 (90514670)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
牧 憲司 九州歯科大学, 歯学部, 教授 (60209400)
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Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2021-03-31
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Keywords | マイクロRNA / マイクロアレイ / ラット / 口腔機能 |
Outline of Annual Research Achievements |
生後3週齢のラット10匹に固形食(コントロール群)もしくは粉末食(実験群)を8週間与えて飼育し、実験期間終了後、深麻酔下で安楽死させ、ただちにすべて のラットの咬筋(浅層、深層)を摘出した。摘出した右側の咬筋の一部でHE染色標本を作製し、残りのサンプルでmicroRNAを含むtotalRNAの抽出を行った。 Total RNAのサンプルから、microRNAおよびDNAマイクロアレイ解析を行い、信頼性のあるmicroRNAとmRNAのみを抽出した。さらに実験群とコントロール群間でttestを行い、p値が0.05未満で発現値の変動倍率が2以上もしくは1/2以下のmicroRNA(浅層;21種、深層;11種)とmRNA(浅層;555種、深層;155)を抽出した。HE 染色標本から、筋線維の平均横断面積と直径を測定し、実験群とコントロール群間における平均値の比較を行った。変動miRNAと変動mRNAの発現値が逆相関関係 にあるものを抽出し、データベース(targetScan, miRDB)を使用してmiRNAのターゲットmRNAの予測を行った。さらに、miRNAと標的mRNAのリアルタイムPCR解析 を行った。その結果、咬筋線維の横断面積は、SD群がControl群よりも有意に低値を示した。マイクロアレイ解析の結果、SDによって有意に発現が下方制御され た39種のmiRNAと、有意に発現が上方制御された74種のmRNAが抽出された。データベース解析の結果、20種のmiRNAと18種の遺伝子からなる合計26のmiRNA-mRNAペ アが抽出された。リアルタイムPCR解析の結果、7種のmiRNAの発現がSDによって有意に下方制御され、5種のmRNAの発現がSDによって有意に上方制御された。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
現在論文投稿中で、今後追加実験等を行う必要があるため。
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Strategy for Future Research Activity |
査読者の意見に従って実験の追加、修正を行い、再投稿を行う。
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Causes of Carryover |
現在論文投稿中であるが、追加実験を行う必要があるため。
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[Journal Article] Bif-1/Endophilin B1/SH3GLB1 regulates bone homeostasis2019
Author(s)
Touyama K, Khan M, Aoki K, Matsuda M, Hiura F, Takakura N, Matsubara T, Harada Y, Hirohashi Y, Tamura Y, Gao J, Mori K, Kokabu S, Yasuda H, Fujita Y, Watanabe K, Takahashi Y, Maki K, Jimi E
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Journal Title
J Cell Biochem
Volume: 120
Pages: 18793-18804
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Presentation] Role of orthodontics in the team approach to cleft lip and palate care: assessing the effectiveness of the NAM appliance2019
Author(s)
Momotoshi Shiga, Masaaki Sasaguri, Hiromi Sawada, Manabu Habu, Koji Watanabe, Yuko Fujita, Mana Hayakawa, Masahiro Mizuhara, Hideo Tanaka, Hirohito Takeuchi, Wataru Fujii, Kenshi Maki, Kazuhiro Tominaga, Noriyoshi Sumiya, Tatsuo Kawamoto
Organizer
第59回日本先天異常学会学術集会
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