2019 Fiscal Year Research-status Report
妊娠性糖尿病におけるインスリン抵抗性亢進への歯周病の関与に関する包括的研究
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17K11988
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Research Institution | Kagoshima University |
Principal Investigator |
長谷川 梢 鹿児島大学, 医歯学域歯学系, 助教 (00404492)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
橋口 千琴 鹿児島大学, 医歯学域鹿児島大学病院, 助教 (10596860)
中村 利明 鹿児島大学, 医歯学域鹿児島大学病院, 講師 (60381183)
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Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2021-03-31
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Keywords | 妊娠性糖尿病 / 歯周病 / 歯周病原細菌 / 糖代謝異常 |
Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、歯周病と妊娠性糖尿病との関連を明らかにするために、1.妊婦を被験者とした歯周病と妊娠性糖尿病の関連の調査、2.胎盤でのインスリン抵抗性の亢進への歯周病原細菌の関与に関する解析を臨床サンプル、in vitro, in vivo研究での実施、3.妊娠性糖尿病妊婦への歯周治療介入の効果、を検討することとしている。昨年度までに1と2の途中まで実施しており、今年度で2の続きと3を中心に実施した。昨年度に引き続き、胎盤由来細胞であるBewo細胞の実験を複数回行い、をFnLPSにて刺激を行ったのちにインスリンにて刺激を行い、IL-6,IL-8,TNF-a,IL-1bの遺伝子発現をreal timePCR法似て解析を行った。また、インスリンレセプターであるIRSとそのリン酸化、AKTとそのリン酸化をウエスタンブロット法にて解析した。その結果、FnLPS刺激によりIL-6とIL-8の遺伝子発現はコントロールと比較し1.4倍、2.2倍上昇した。また、FnLPS刺激後インスリンを添加すると引き起こされるIRSとAKTのリン酸化は、FnLPSの刺激濃度依存的に減少した。このことにより、FnLPSにより胎盤においてインスリン抵抗性が引き起こされる事が示され、歯周病が妊娠性糖尿病に関連する可能性を示唆できた。さらに、グルコースの添加による影響を調べ、グルコース添加によりその傾向が強くなることを確認した。同様の実験を、他の絨毛膜細胞であるJEG3にて行ったが、JEG3ではBeWo細胞で認められるような、顕著な反応は認められず、細胞によって反応性に違いがあることが明らかになった。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
本年度は、 昨年から引き続き行っているBeWo細胞を用いた研究加え、他の胎盤由来細胞であるJEG3を用いて同様の研究を行った。さらに、より糖尿病の状態に近づけるためにグルコースを添加する実験も追加した。しかしながら、胎盤から分離培養して得られるプライマリーの細胞を用いた分析の実行まで至らなかった、やや遅れていると思われる。さらに、介入研究も患者の紹介協力が得られず、なかなか進められなかったためやや遅れている。
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Strategy for Future Research Activity |
今後もin vitro、in vivo研究を学院生の先生を研究協力者に加えて研究を遂行することで、当初の研究計画を進めていく。さらに、被験者数を確保するために被験者を登録する産婦人科を増やすこととし、さらにスピーディーに進めることとする。
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Causes of Carryover |
in virto研究のプライマリー細胞を用いた研究と、介入研究が予定より遅れたため次年度使用額が生じた。次年度使用額は、次年度のIn vitro研究と介入研究に関わる費用やその成果発表に使用する計画である。
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Research Products
(2 results)