2018 Fiscal Year Research-status Report
Exploration for Polyunsaturated Fatty Acids (PUFA)-responsive domain on Sterol Regulatory Element-binding Protein-1
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17K12895
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
升田 紫 東京大学, 医学部附属病院, 特任助教 (50768554)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 脂質代謝異常 / ニュートリゲノミクス / 転写因子SREBP / 多価不飽和脂肪酸 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
多価不飽和脂肪酸（PUFA）は肝臓における中性脂肪合成を抑制し、高脂血症治療薬に用いられる。肝臓における脂肪酸やコレステロール合成を制御する転写因子としてSREBP（sterol regulatory element-binding protein）が知られるが、SREBPに対するPUFAの作用機序は未解明な点が多い。我々は先行研究において、アデノウイルスで導入したルシフェラーゼレポーターの定量を行い、生きたマウスの肝臓におけるSREBPの切断活性をin vivo imaging system(IVIS)で評価するアッセイ系を構築した。その研究では、PUFAがSREBP-1の切断活性を特異的に抑制する事(一方でSREBP-2の切断活性は抑制しない事)を明らかにしたが、詳細な機序は未解明であった。そこで肝臓におけるSREBP-1特異的なPUFA作用ドメインを絞り込み同定し、SREBP-1上のPUFA作用ドメインで相互作用する分子を探索する事を目的とし、本研究に取り組んでいる。申請者はSREBP-1とSREBP-2のハイブリッド分子等、SREBPの配列を改変した自作の分子を複数作成し、特性を評価している。IVISを用いた実験からSREBP-1上の PUFA作用ドメインがCOOH末端側に存在する事が判明し、SREBP-1上のC末端側を中心に配列を改変したコンストラクト作成を進め、切断活性の評価を重ねている。並行し、培養細胞で切評価する系の構築にも努め、PUFA作用ドメインで相互作用する未知の蛋白の検出に取り組んでいる。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
前年度に引き続き、SREBP配列を様々に改変したオリジナルコンストラクトを複数の培養細胞で評価する系の構築に努めた。結果、特定の細胞株においてSREBP-1がPUFAにより特異的に抑制される条件を絞り込めたため、PUFA作用ドメインとしてより詳細なSREBP上の配列の特定に努めることが可能となると考えている。
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| Strategy for Future Research Activity |
上述のように絞り込んだSREBP-1上の配列をもとにオリジナルコンストラクトを更に作成し、培養細胞とあわせて、同コンストラクトをアデノウイルス化し、マウスの肝臓でも評価を進める予定である。
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[Journal Article] Glucocorticoid receptor suppresses gene expression of Rev-erbα (Nr1d1) through interaction with the CLOCK complex.2019
Author(s)
Murayama Y, Yahagi N, Takeuchi Y, Aita Y, Mehrazad Saber Z, Wada N, Li E, Piao X, Sawada Y, Shikama A, Masuda Y, Nishi-Tatsumi M, Kubota M, Izumida Y, Miyamoto T, Sekiya M, Matsuzaka T, Nakagawa Y, Sugano Y, Iwasaki H, Kobayashi K, Yatoh S, Suzuki H, Yagyu H, Kawakami Y, Shimano H.
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Journal Title
FEBS Lett.
Volume: 593(4)
Pages: 423-432
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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