2017 Fiscal Year Research-status Report
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17K14952
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| Research Institution | Hyogo Medical University |
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Principal Investigator |
湊 雄介 兵庫医科大学, 医学部, 助教 (00710245)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | オリゴデンドロサイト / 分化 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
脳梗塞後、梗塞巣内に多分化能を有した虚血周皮細胞が出現することが見出された。虚血周皮細胞を無血清下で特定の細胞外マトリックス上で培養することでオリゴデンドロサイト前駆細胞様細胞(以下OPC様細胞と略)が得られる可能性を見出した。本研究では、この現象のメカニズム解明を通して脱髄疾患の細胞治療への応用へつなげることを目的とした。
OPC様細胞を無血清下でPDGF-A、B、Dでそれぞれ刺激したが、増殖能や継代回数は改善できなかった。このとき、受容体であるPDGFRαおよびβはいずれも発現していることをRT-PCRで確認した。他の増殖因子でも検討を行ったが、いずれも改善はみられなかった。
OPC様細胞の維持・増殖が困難であったことから、OPC様細胞への誘導を経ずに虚血周皮細胞からオリゴデンドロサイトへの分化誘導を試みた。その結果、OPC様細胞誘導に用いた細胞外マトリックス上で分化誘導することにより成熟オリゴデンドロサイトマーカーの発現を検出することができた。一方、他の細胞外マトリックスを用いると神経細胞マーカーの発現が誘導された。しかし、いずれもその効率は低かった。
虚血周皮細胞を上記の細胞外マトリックス上でそれぞれ培養すると、神経系のマーカーの発現に特徴的な変化が認められるという知見が得られた。現在は得られた知見をもとに、細胞外マトリックスと神経系マーカーの発現との間にどのような関連性があるかを、血清や増殖因子による影響も含め詳細に検討している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
動物実験施設の移転に伴い動物実験を5ヶ月間中断していたため、虚血周皮細胞の供給が十分ではなく継代数が少ない状況における細胞の解析があまり行えなかった。
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| Strategy for Future Research Activity |
継代数が少ない状態における解析が不十分であるため、細胞外マトリックスと神経系マーカー、幹細胞マーカーとの関係について、主に蛍光免疫染色により解析を進める。得られた知見から、効率のよい分化誘導法を探索する。
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| Causes of Carryover |
動物実験施設の移転に伴い動物実験を5ヶ月間中断していたため、予定していたよりも実験を行えず次年度使用額が生じた。
今後細胞外マトリックスとマーカー分子との関係についての解析や、分化誘導法の検討を行う予定であり、その際必要な試薬、培養器具、培地等の購入に使用を予定している。
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