2018 Fiscal Year Research-status Report
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17K14952
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| Research Institution | Hyogo Medical University |
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Principal Investigator |
湊 雄介 兵庫医科大学, 医学部, 助教 (00710245)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | オリゴデンドロサイト / 虚血周皮細胞 / 分化 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
脳梗塞後、梗塞巣内に多分化能を有した虚血周皮細胞が出現することが見出された。虚血周皮細胞を無血清下で特定の細胞外マトリックス上で培養することでオリゴデンドロサイト前駆細胞様細胞(以下OPC様細胞と略)が得られる可能性を見出した。本研究では、この現象のメカニズム解明を通して脱髄疾患の細胞治療への応用へつなげることを目的とした。
平成29年度の研究から、OPC様細胞自体の維持・増殖が難しいこと、また虚血周皮細胞からOPC様細胞を経ずにオリゴデンドロサイトマーカーを発現する細胞を誘導することはできたが、その効率は著しく低いことがわかった。
そこで平成30年度では虚血周皮細胞と細胞外マトリックスの関係を検討し、効率の良い分化誘導法を探索した。虚血周皮細胞をある細胞外マトリックス上で高密度培養すると、培養100日を超える長期培養(継代回数10回以上)が可能であった。さらに、10回継代した虚血周皮細胞から効率よく神経細胞マーカーおよびアストロサイトマーカーを発現する細胞へそれぞれ分化誘導することができた。虚血周皮細胞はこれまで30日以上の培養が困難であり、またその分化能も2回の継代で失われてしまっていた。今回得られた結果は細胞外マトリックスによって分化可能な虚血周皮細胞が従来の1000倍以上得られることを示しており、虚血周皮細胞を細胞治療へ臨床応用する上で非常に有用であると考えられた。一方、オリゴデンドロサイトマーカーを発現する細胞への分化誘導はできなかった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
神経細胞マーカーやアストロサイトマーカーを発現する細胞にそれぞれ分化可能な虚血周皮細胞を大量に得る方法を新たに見出した。このことはオリゴデンドロサイトマーカーを発現する細胞へも分化誘導可能であることを示唆すると考えられるが、未だ分化誘導できておらず、標榜した研究課題名に対する進捗状況としてはやや遅れていると判断せざるを得ない。
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| Strategy for Future Research Activity |
オリゴデンドロサイトマーカーを発現する細胞へ誘導できうると考えているが、これまでにも条件検討を行ってきており、これ以上の分化条件検討は現時点では非効率的であると考えられる。一方、神経細胞マーカーやアストロサイトマーカーを発現する細胞にそれぞれ分化可能な虚血周皮細胞を大量に得る方法を新たに見出した。しかし、細胞外マトリックスがどのように分化能の維持に寄与しているかは明らかになっていない。そこで、まず細胞外マトリックスが幹細胞マーカーや分化効率に与える影響を解析し、論文にまとめる。その過程でオリゴデンドロサイトへの分化誘導方法に関する知見を得ることを目指す。
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| Causes of Carryover |
分化誘導法の検討に時間がかかり、予定していたよりも細胞外マトリックスと各種マーカー分子との関係についての解析が進まなかったため、次年度使用額が生じた。
今後は細胞外マトリックスと各種マーカー分子との関係についての解析を主に行っていく予定であり、その際に必要な抗体、試薬、培養器具、培地等の購入に使用を予定している。
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