Development of the method for short-term acquisition of oligodendrocytes

2019 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 17K14952
• Research Institution: Hyogo Medical University
• Principal Investigator: 湊 雄介 兵庫医科大学, 医学部, 助教 (00710245)
• Project Period (FY): 2017-04-01 – 2020-03-31
• Keywords: 虚血周皮細胞 / 分化

Outline of Annual Research Achievements

平成30年度までの研究から、細胞外マトリックスを用いた高密度培養により分化可能な虚血周皮細胞を長期維持できる可能性を見いだした。
そこで令和元年度では、再現性を検証するべく複数のロットについて検討を行った。その結果、細胞そのものの長期維持はすべてのロットにおいて可能であったが、分化能はロット間でばらつきがあった。虚血周皮細胞は脳梗塞巣から混合培養で得られることから、培養中に含まれる各種細胞の割合のロット間差によって分化能維持に必要な因子にもばらつきが生じることが原因であると考えられた。
BMPシグナルは神経幹細胞の分化や維持の制御、多能性幹細胞からの神経幹細胞への誘導時などへの関与が多数報告されている。そこでBMPシグナルのアゴニスト、アンタゴニストを添加して虚血周皮細胞を培養した。アゴニスト/アンタゴニスト無添加時では虚血周皮細胞はタンジェントカーブ様の増殖曲線を描くが、アゴニスト/アンタゴニスト添加により増殖曲線はいずれも直線になった。アゴニスト/アンタゴニストどちらも複数回継代後も神経マーカーの発現を誘導したが、アゴニストではその後神経マーカーを発現しない細胞の増殖が顕著となった。一方アンタゴニストではその後も神経マーカーの発現を誘導でき、形態も神経幹細胞に似たものであった。
以上の結果から、BMPシグナルが分化可能な虚血周皮細胞の長期維持に関与していることが強く示された。現在得られた結果を論文・学会発表するため準備を行っている。