「ヒト化マウス」を用いたヒトミクログリアの脳機能制御に関する研究

2019 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 17K14961
• Research Institution: University of Yamanashi
• Principal Investigator: PARAJULI Bijay 山梨大学, 大学院総合研究部, 助教 (00748783)
• Project Period (FY): 2017-04-01 – 2021-03-31
• Keywords: ヒトミクログリア

Outline of Annual Research Achievements

ミクログリアは、これまで脳内の免疫細胞として考えられてきたが、神経再生、シナプス新生ならびに神経ネットワークの切り替えなど、実に多彩で重要な脳機 能に深く関与していることが明らかになっている。また、動物モデルではミクログリアの機能異常がてんかんやうつ病といった難治性中枢性疾患の発症及び増悪 に大きく関わっていることも最近数多く報告されている。ミクログリアの研究は主にマウスミクログリアを中心に行われてきた。一方で、ヒトミクログリアの研 究も一部行われているが、これらは主にin vitro 実験系で展開されている。しかし、マウスミクログリアとヒトミクログリアはその分子発現及び機能に大きな 差があること、ミクログリアの性質はin vivo とin vitro で予想以上に乖離があること等が問題となっている。したがって、ミクログリアを標的とした治療戦 略の確立のためには、in vivo 実験系におけるヒトミクログリアの理解が急務である。
昨年度までは完全非侵襲的な、経鼻移植法経鼻移植法により ヒトミクログリアを移植する方法を確立した。種々の条件の最適化により移植後少なくとも二ヶ月間は安定的に海馬及び小脳に定着させる方法を確立し、移植後の各時点（7, 14, 28,60 日後）における脳を採取し、PFA 固定標本を作製し、ヒト細胞特異的な抗Stem121抗体を用いて免疫組織学的解析を行い、ヒトミクログリアの性質を形態学的に解析した。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

本年度ではマウスの脳内に移植したヒトミクログリアの形態を解析する予定でした。移植したヒトミクログリアの形態解析に使用する予定のレーザー共焦点が故障したため時間を要した。

Strategy for Future Research Activity

今年度はヒトミクログリアとホストのマウスミクログリアとの関連性（排除・共存）、増殖の有無等を正確に解析し、ヒト化マウスの評価系としての有用性および問題点を明確にする。また、今年度までの研究成果を学術誌に論文として発表する。

Causes of Carryover

本年度ではマウスの脳内に移植したヒトミクログリアの形態を解析する予定でした。移植したヒトミクログリアの形態解析に使用する予定のレーザー共焦点が故障したため時間を要した。今年度は追加実験を行い、実験成果を取りまとめ論文を投稿する。