2017 Fiscal Year Research-status Report
生殖細胞欠損胚を用いた、効率的なキメラ生産技術について
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17K15359
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| Research Institution | University of Yamanashi |
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Principal Investigator |
長友 啓明 山梨大学, 大学院総合研究部, 特任助教 (30746813)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | ゲノム編集 / 始原生殖細胞 / 胚移植 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
平成２９年度は、生殖細胞を欠損させるために始原生殖細胞形成初期から発現するPrdm14をターゲットとして決定した。guide RNAを複数設計し受精卵前核へ注入後、移植し産仔を解析すると、ホモで欠損している個体を確認でき、精巣を16週齢で摘出すると、同齢の野生型と比較し明らかにサイズが小さくなり、また精巣内および精巣上体尾部中に精子は無く、生殖細胞が完全に欠損していることが確認できた。また、Prdm14遺伝子のヘテロ欠損個体において、野生型と比較して顕著に精巣のサイズが小さくなっており、ヘテロ欠損であっても、キメラにおける目的細胞の寄与効率が上昇することが期待される結果であった。さらに、より高効率な生殖細胞欠損個体作出のため、Prdm14 guide RNAを複数設計し、各々のゲノム編集効率を調査した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
当該年度は職場の異動に伴い、実験環境のセットアップに時間を費やしたため、胚移植を伴う実験には若干の遅れが生じたが、ES細胞を樹立する細胞培養実験を前倒しで行い、当初の予定に近い段階まで進めることが出来たため。
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| Strategy for Future Research Activity |
現在のところほぼ当初の計画通りに遂行されており、30年度は予定通りキメラ個体作製実験を中心に行う。ここまでのマウス実験を主にしたデータで論文としてまとめる予定である。
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| Causes of Carryover |
研究代表者の異動に伴い研究室のセットアップに時間を要し胚移植に関わる実験に若干の遅れが生じたため。マウス飼育環境も整ったため、30年度は胚移植試験を重点的に行う。
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[Journal Article] Healthy offspring from freeze-dried mouse spermatozoa held on the International Space Station for 9 months.2017
Author(s)
Wakayama S, Kamada Y, Yamanaka K, Kohda T, Suzuki H, Shimazu T, Tada MN, Osada I, Nagamatsu A, Kamimura S, Nagatomo H, Mizutani E, Ishino F, Yano S, Wakayama T.
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Journal Title
Proc Natl Acad Sci U S A.
Volume: 114(23)
Pages: 5988-5993
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Presentation] Healthy offspring from freeze-dried mouse spermatozoa held on the International Space Station for 9 months.2017
Author(s)
Wakayama S, Kamada Y, Yamanaka K, Kohda T, Suzuki H, Shimazu T, Tada MN, Osada I, Nagamatsu A, Kamimura S, Nagatomo H, Mizutani E, Ishino F, Yano S, Wakayama T.
Organizer
World Congress of Reproductive Biology 2017
Int'l Joint Research
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