2018 Fiscal Year Annual Research Report
Regulatory mechanisms of miRNA biogenesis which is involved in tumorigenesis for approach to cancer therapy
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17K15601
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| Research Institution | Kochi University |
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Principal Investigator |
樋口 琢磨 高知大学, 教育研究部医療学系基礎医学部門, 助教 (10754567)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | miRNA / RNA結合タンパク質 / フィードバックループ |
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| Outline of Annual Research Achievements |
二本鎖RNA結合タンパク質NF90は結合パートナーであるNF45と複合体(NF90-NF45)を形成し、miRNAの初期転写産物(pri-miRNA)に結合することでmiRNAの生合成を阻害している。一方で、NF90-NF45が結合するpri-miRNAの配列的・構造的特徴については未だ不明な点が多い。本研究では、NF90およびNF90-NF45が強く結合するpri-miRNAの特徴を見出すことを目的としている。
今回、国際共同研究を実施し、その成果として、NF90が結合するpri-miRNAの構造的特徴の候補として「ミスマッチが少ないステム構造」が見出された。そこで我々はNF90と強く結合するpri-miRNAの配列に変異を導入し、ステム構造内にミスマッチを含む変異型pri-miRNA probeを作製しNF90との結合性を検証した。その結果、コントロールpri-miRNAと比較し変異型pri-miRNAではNF90との結合性が顕著に低下した。これらの結果から、NF90はpri-miRNAのステム構造内のミスマッチ率によって結合するpri-miRNAを認識している可能性が考えられた。
また、NF90は様々な組織由来の癌部において発現増加しているが、その詳細なメカニズムについては明らかにされていない。これまでの我々の研究で、NF90-NF45が癌抑制型miRNAであるmiR-7の生合成を負に制御することを報告している。その研究の中で、miR-7の過剰発現によりNF90の発現が顕著に減少することを見出した。そこで、データベース解析及びレポーターアッセイを実施した結果、miR-7がNF90のmRNAを直接の標的として、NF90の発現を抑制することを明らかとした (Higuchi et al., BBRC, 2018)。今回の結果からNF90-NF45とmiR-7の間にはフィードバックループが存在することが示唆された。
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