2020 Fiscal Year Annual Research Report
Evaluation of cell-to-cell transmission in Hepatitis B Virus
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17K15708
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| Research Institution | Meiji University |
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Principal Investigator |
竹内 潤子 (柴田潤子) 明治大学, 研究・知財戦略機構(生田), 特任講師 (80647488)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | ウィルス / B型肝炎ウイルス / HBV |
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| Outline of Annual Research Achievements |
エイズの原因ウイルスであるヒト免疫不全ウイルス1型（HIV-1）には2つの感染様式が存在することが知られている。細胞外に放出されたウイルス粒子が新たな標的細胞に感染するcell-free 感染と、感染細胞が標的細胞に接触することでウイルス粒子を直接受け渡すcell-to-cell 感染である。申請者らは数学と実験を融合したアプローチにより、HIV-1感染におけるcell-to-cell 感染の寄与率を明らかにしている（Iwami and Takeuchi et al. eLife 2015）。一方、B型肝炎ウイルス（HBV）に関しては、これまで簡便で効率的な感染許容細胞株が存在しなかったことからcell-to-cell 感染様式の報告はなかった。
本研究では、HBV感染許容細胞およびHBV粒子放出細胞の共培養実験系を用いることで、以下に述べる通り、HBVのcell-to-cell感染のみが生じる実験系を構築した。通常のHBV 感染実験ではcell-free 感染とcell-to-cell 感染が混在した状態にあるが、培養液中にHBV 中和抗体を添加し続けcell-free 感染を阻止するとcell-to-cell 感染のみが生じる。HBV 中和抗体を添加し続けた培地、つまりcell-to-cell 感染のみが生じる条件下においてドナー細胞と標的細胞を11 日間共培養後、細胞を抗HBV 抗原抗体で染色しflow-cytometry で解析した結果、中和抗体添加培地においてもHBV 抗原陽性の標的細胞が存在した。これは、HBV によるcell-to-cell 感染が確認できた可能性を示唆している。さらに、HBV のcell-to-cell 感染のみが生じる実験系を1細胞解析に持ち込むことで、HBV のcell-to-cell 感染を高感度かつ定量的に評価できる系を開発した。
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