PD患者髄液中αSyn複合体解析による、エクソソームを介した凝集体伝播機構の解明

2018 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 17K16122
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 池中 建介 大阪大学, 医学系研究科, 助教 (70774058)
• Project Period (FY): 2017-04-01 – 2020-03-31
• Keywords: エクソソーム / シヌクレイン

Outline of Annual Research Achievements

シヌクレインが凝集体を形成する過程において、オートファジーの関与が重要であることを捉えた。また、αSynの構造多型が凝集体の形成に関与することを捉えた。
構造多型がどのように関与するかについて、より詳細に検証した。Conformer AおよびBに対する、Fibril AおよびBのシーディング効果の特異性を用いることで、髄液中に含まれるシヌクレイン凝集物がFibril AかBかを判別することができ、ひいてはPD（Fibril A）かMSA（Fibril B）かを判別できることである。
シーディング効果の特異性とあるが、シーディング効果というのは、あるタンパク質の単量体溶液に、微量の凝集物（シード）を添加した場合、その添加した凝集物により凝集反応が促進される現象、およびそれによりできる凝集産物が、もとのシードと同様の立体構造をもつ現象をさす。その原則通り、Conformer AにFibril Aを添加すると、すみやかにFibril Aが増幅し、Conformer AにFibril Bを添加すると速やかにFibril Bが増幅される。
一方で、シーディング効果の特異性は、時に特定のシードが特定の単量体にシード効果を示さないことがあることをいう。Conformer BにFibril Aを添加してもFibril Aのシード効果はなく、凝集は通常通りの速さで最終産物はFibril Bができる。Conformer BにFibril Bを添加する場合は、凝集は促進されFibril Bができる。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

エクソソームからαSynの複合体を免疫沈降する方法が苦慮している。

Strategy for Future Research Activity

シヌクレインを含むエクソソームの解析方法を別途検討し、解析する。
また構造多型がどのように放出に影響するかを調べる

Causes of Carryover

シヌクレインのエクソソーム解析を新たな手法が試みる

Research Products

• [Journal Article] Ultrasonication-based rapid amplification of α-synuclein aggregates in cerebrospinal fluid. (2019)
  • Author(s): Kakuda K, Ikenaka K, Araki K, So M, Aguirre C, Kajiyama Y, Konaka K, Noi K, Baba K, Tsuda H, Nagano S, Ohmichi T, Nagai Y, Tokuda T, El-Agnaf OMA, Ogi H, Goto Y, Mochizuki H.
  • Journal Title: Scientific Reports Volume: Apr,12;9 Pages: 6001
  • DOI: 10.1038/s41598-019-42399-0.
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research