異所性ACTH産生褐色細胞腫の発症機構の解明

2017 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 17K16160
• Research Institution: Chiba University
• Principal Investigator: 佐久間 一基 千葉大学, 医学部附属病院, 特任助教 (70791721)
• Project Period (FY): 2017-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: ACTH / 褐色細胞腫

Outline of Annual Research Achievements

異所性ACTH産生症候群は、下垂体以外の組織から発生した腫瘍がACTHを産生・分泌し、過剰分泌されたACTHによってクッシング様徴候を呈する症候群であるが、腫瘍におけるACTH自律分泌獲得の分子機構は十分には明らかにされていない。本研究の目的は、褐色細胞腫でのACTH自律分泌能獲得におけるメチル化制御異常と神経発生分化制御システムの役割を解明することにある。異所性ACTH産生褐色細胞腫の腫瘍組織では、ACTH前駆体であるPOMCのpromoter領域の低メチル化が確認されている。褐色細胞腫の25%が遺伝性であり、遺伝子変異が褐色細胞腫の臨床病型を規定する重要な因子と考えられており、ACTH産生褐色細胞腫の腫瘍組織を用いたエクソーム解析を行い、DNAメチル化制御異常を引き起こすエピジェネティック制御遺伝子変異の有無を評価したが、同定されなかった。次に、脱メチル化によるPOMC発現への影響を評価するために、クロム親和性細胞由来の腫瘍である神経芽細胞株IMR32を用いて、脱メチル化剤デシタビン投与を行い、パイロシークエンスによるPOMC promoterのメチル化定量と遺伝子発現解析を施行した。POMC promoter領域が脱メチル化したサンプルでは、POMC mRNA発現の上昇を認め、更に興味深いことに異所性ACTH産生褐色細胞腫の腫瘍組織を用いたRNA-sequencingの解析から、着目した神経発生制御に関わる転写因子が、デシタビン添加によりPOMCの発現誘導された際に発現上昇を認め、POMC発現制御に関わることが示唆された。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

神経発生制御システムがPOMC発現に関与が示唆され、現在同定した転写因子のノックダウン、過剰発現によるPOMC遺伝子発現解析も進んでいる。

Strategy for Future Research Activity

①CRISPR/Cas9系を応用した標的ゲノム局所の脱メチル化法とパイロシークエンスを用いたDNAメチル化定量を組み合わせてPOMC発現制御調節関わる脱メチル化部位を同定する。
②ACTH産生褐色細胞腫の腫瘍組織を用いたRNA-sequensing解析から、POMC発現制御の上流に神経発生分化制御システムに関わる転写因子の関与を示す知見を得ていることから、神経発生分化制御システムに関わる転写因子のPOMC promoter領域へのリクルートメント評価と新たな結合蛋白質の探索を行う。

Causes of Carryover

成果報告のための学会の旅費を計上したが、使用しなかった。次年度の旅費に使用を計画している。

Research Products

• [Journal Article] Prednisolone-responsive Postpartum IgG4-related Hypophysitis (2018)
  • Author(s): Koide H, Shiga A, Komai E, Yamato A, Fujimoto M, Tamura A, Kono T, Nakayama A, Takiguchi1 T, Higuchi S, Sakuma I, Nagano H, Hashimoto N, Suzuki S, Takeda Y, Shibuya M, Nishioka H, Yamada S, Inoshita N, Ishiwatari N, Horiguchi K, Yokote K, Tanaka T.
  • Journal Title: Intern Med Volume: 57 Pages: 367～375
  • DOI: doi: 10.2169/internalmedicine.8446-16
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] CONGESTIVE HEART FAILURE SECONDARY TO A TSH-SECRETING PITUITARY ADENOMA AGGRAVATED BY TAKOTSUBO CARDIOMYOPATHY IN AN ELDERLY PATIENT (2018)
  • Author(s): Sakuma Ikki、Koide Hisashi、Yoshida Tomohiko、Yamato Azusa、Fujimoto Masanori、Tamura Ai、Komai Eri、Kono Takashi、Nagano Hidekazu、Horiguchi Kentaro、Yokote Koutaro、Tanaka Tomoaki
  • Journal Title: AACE Clinical Case Reports Volume: 4 Pages: e115～e123
  • DOI: 10.4158/EP171968.CR
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] SEVEN FAMILIAL DYSALBUMINEMIC HYPERTHYROXINEMIA CASES IN THREE UNRELATED JAPANESE FAMILIES AND HIGH-PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY ANALYSIS OF THE THYROXINE BINDING PROFILE (2017)
  • Author(s): Nagano Hidekazu、Nakagawa Yoshinori、Ishikawa Naofumi、Watanabe Hiroya、Miyabayashi Yui、Nakayama Akitoshi、Fujimoto Masanori、Komai Eri、Shiga Akina、Tamura Ai、Kono Takashi、Takiguchi Tomoko、Higuchi Seiichiro、Sakuma Ikki、Hashimoto Naoko、Suzuki Sawako、Koide Hisashi、Yokote Koutaro、Tanaka Tomoaki
  • Journal Title: Endocrine Practice Volume: 23 Pages: 1325～1332
  • DOI: 10.4158/EP171964.OR
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Multihormonal pituitary adenoma concomitant with Pit-1 and Tpit lineage cells causing acromegaly associated with subclinical Cushing’s disease: a case report (2017)
  • Author(s): Takiguchi Tomoko、Koide Hisashi、Nagano Hidekazu、Nakayama Akitoshi、Fujimoto Masanori、Tamura Ai、Komai Eri、Shiga Akina、Kono Takashi、Higuchi Seiichiro、Sakuma Ikki、Hashimoto Naoko、Suzuki Sawako、Miyabayashi Yui、Ishiwatari Norio、Horiguchi Kentaro、Nakatani Yukio、Yokote Koutaro、Tanaka Tomoaki
  • Journal Title: BMC Endocrine Disorders Volume: 17 Pages: 54
  • DOI: 10.1186/s12902-017-0203-5
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Presentation] 症例から学ぶ副腎性高血圧症の病理と遺伝子変異 副腎静脈サンプリングで機能性を確認しえたアルドステロン産生腺腫合併の無症候性褐色細胞腫 (2017)
  • Author(s): 佐久間一基, 山崎 有人, 笹野 公伸, 横手 幸太郎, 田中 知明
  • Organizer: 第40回日本高血圧学会総会
  • Invited
• [Presentation] FBPase欠損症の成人例で同定されたFBP1新規変異とその機能解析 (2017)
  • Author(s): 佐久間一基, 藤本真徳、大和梓、田村愛、駒井絵里、志賀明菜、河野貴史、中山哲俊、永野秀和、鈴木佐和子、小出尚史、田中知明、横手幸太郎
  • Organizer: 第90回日本内分泌学会学術総会
• [Presentation] セリチニブ投与後に血糖コントロール悪化を認めた2型糖尿病の1例 (2017)
  • Author(s): 佐久間一基、石田 晶子, 吉井 聡美, 出口 ハンナ, 大和 梓, 藤本 真徳, 田村 愛, 駒井 絵里, 河野 貴史, 永野 秀和, 小出 尚史, 田中 知明, 横手 幸太郎
  • Organizer: 第27回臨床内分泌代謝Update
• [Presentation] FBPase欠損症の成人例で同定されたFBP1新規変異とその機能解析 (2017)
  • Author(s): 佐久間一基、藤本 真徳, 大和 梓, 田村 愛, 駒井 絵里, 志賀 明菜, 河野 貴史, 中山 哲俊, 永野 秀和, 鈴木 佐和子, 小出 尚史, 田中 知明, 横手 幸太郎
  • Organizer: 第60回日本糖尿病学会年次学術集会