Development of a novel therapeutic method for myeloproliferative neoplasia by identifying a novel driver mutation and analyzing its function.

2019 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 17K16195
• Research Institution: Juntendo University
• Principal Investigator: 今井 美沙 順天堂大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (50709003)
• Project Period (FY): 2017-04-01 – 2020-03-31
• Keywords: triple-negative MPN / 骨髄増殖性腫瘍 / 造血器腫瘍 / 全エクソン配列解析 / ドライバー遺伝子変異 / サイトカイン非依存性増殖

Outline of Annual Research Achievements

フィラデルフィア染色体陰性の骨髄増殖性腫瘍（以下MPNと略する）は、造血幹細胞レベルに体細胞変異が生じることで引き起こされる造血器の腫瘍である。MPNを引き起こすドライバー遺伝子変異として、JAK2、MPL、CALR変異が同定されているが、これらの遺伝子変異の検出されないtriple-negative症例が存在しており、その一部は予後不良との報告がある。これまでに、申請者の所属する研究室では、MPN疑い1804症例における、JAK2変異、CALR変異、MPL変異の有無と、各患者の臨床情報を収集し、WHO2008診断基準を用いて、triple-negative MPN確定症例を同定し、次世代シークエンサーを用いて全エクソン配列を決定した。そして、得られた配列情報を元に、腫瘍検体に共通するこれまでに報告のない新規体細胞遺伝子変異を同定し、新規のドライバー変異候補遺伝子とその野生型遺伝子を発現するBa/F3細胞を用いて、細胞の増殖アッセイを行い、変異遺伝子導入細胞がサイトカイン非依存性の細胞増殖能を有することを確認した。一方、ドライバー遺伝子変異として報告されているMPLの野生型遺伝子を発現するBa/F3細胞を、そのリガンドであるTPO非依存下で数週間培養すると、リガンド非依存性に細胞増殖し、MPL下流のシグナル伝達経路の恒常的な活性化が生じることが明らかになった。これは、野生型MPLによる下流シグナル伝達因子の恒常的な活性化がMPNの新たな発症メカニズムである可能性を示唆している。つまり、本研究の研究成果に基づいたさらなる研究の推進により、triple-negative MPN発症の新たな分子基盤が解明され、患者の迅速な診断法や、有効な治療法の開発に直結することが期待される。

Research Products

• [Journal Article] JAK2 exon 12 mutation in myelodysplastic/myeloproliferative neoplasm with ring sideroblasts and thrombocytosis: Not an exclusive mutation to polycythaemia vera (2019)
  • Author(s): Inano Tadaaki、Araki Marito、Morishita Soji、Imai Misa、Yasuda Hajime、Nitta Hideaki、Ito Masafumi、Edahiro Yoko、Ochiai Tomonori、Misawa Kyohei、Fukuda Yasutaka、Ohsaka Akimichi、Komatsu Norio
  • Journal Title: British Journal of Haematology Volume: 187 Pages: e27-e31
  • DOI: 10.1111/bjh.16146
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Evidence for prevention of renal dysfunction associated with primary myelofibrosis by cytoreductive therapy (2019)
  • Author(s): Fukuda Yasutaka、Araki Marito、Yamamoto Kouji、Morishita Soji、Inano Tadaaki、Misawa Kyohei、Ochiai Tomonori、Edahiro Yoko、Imai Misa、Yasuda Hajime、Gotoh Akihiko、Ohsaka Akimichi、Komatsu Norio
  • Journal Title: Haematologica Volume: 104 Pages: e506～e509
  • DOI: 10.3324/haematol.2018.208876
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Mutant calreticulin interacts with MPL in the secretion pathway for activation on the cell surface (2019)
  • Author(s): Masubuchi Nami、Araki Marito、Yang Yinjie、Hayashi Erina、Imai Misa、Edahiro Yoko、Hironaka Yumi、Mizukami Yoshihisa、Kihara Yoshihiko、Takei Hiraku、Nudejima Mai、Koike Masato、Ohsaka Akimichi、Komatsu Norio
  • Journal Title: Leukemia Volume: 34 Pages: 499～509
  • DOI: 10.1038/s41375-019-0564-z
  • Peer Reviewed
• [Presentation] 真正トリプルネガティブ本態性血小板血症における臨床的・分子生物学的特異性. (2019)
  • Author(s): 稲野資明, 荒木真理人, 森下総司, 落合友則, 三澤恭平, 福田泰隆, 緑川直子, 橳島麻衣, 伊藤雅文, 大佐賀智, 枝廣陽子, 今井美沙, 田口鉄平, 奥田真帆, 大坂顯通, 小松則夫.
  • Organizer: 第81回日本血液学会学術集会
• [Presentation] JAK2 V617Fのコピー数はサイトカイン受容体の活性化に重要である. (2019)
  • Author(s): 北澤爽汰, 荒木真理人, 塩入香穂, 森下総司, 増渕菜弥, 馬場照美, 山本誠司, 堀内祥行, 今井美沙, 大坂顯通, 小松則夫.
  • Organizer: 第81回日本血液学会学術集会
• [Presentation] CALR遺伝子変異による骨髄増殖性腫瘍モデルマウスの作出. (2019)
  • Author(s): 今井美沙, 福田泰隆, 田口鉄平, 三澤恭平, 童紅連, 荒木喜美, 大里元美, 荒木真理人, 大坂顯通, 小松則夫.
  • Organizer: 第81回日本血液学会学術集会
• [Presentation] 変異型calreticulin特異的配列によるゴルジ体への局在. (2019)
  • Author(s): 水上喜久, 荒木真理人, 今井美沙, 林英里奈, 増渕菜弥, 楊印杰, 木原慶彦, 弘中由美, 大坂顯通, 小松則夫.
  • Organizer: 第81回日本血液学会学術集会
• [Presentation] 真性多血症患者由来iPS細胞におけるJAK2 V617F変異の修正. (2019)
  • Author(s): 枝廣陽子, 劉暢, 荒木真理人, 橳島麻衣, 森下総司, 今井美沙, 増渕菜弥, 水上喜久, 眞野修一, 竹井拓, 大坂顯通, 小松則夫.
  • Organizer: 第81回日本血液学会学術集会
• [Presentation] 変異型CALRはMPLと分泌経路で相互作用し細胞表面で活性化を引き起こす. (2019)
  • Author(s): 増渕菜弥, 荒木真理人, 楊印杰, 林英里奈, 今井美沙, 枝廣陽子, 弘中由美, 水上喜久, 木原慶彦, 小池正人, 大坂顯通, 小松則夫.
  • Organizer: 第81回日本血液学会学術集会
• [Presentation] 全トランス型レチノイン酸による白血病細胞分化制御因子の同定. (2019)
  • Author(s): 角南義孝, 荒木真理人, 山本誠司, 白根脩一, 堀内祥行, 辻岡 一也, 茂櫛薫, 山口茂夫, 今井美沙, 森下総司, 大坂顯通, 小松 則夫.
  • Organizer: 第29回日本サイトメトリー学会学術集会
• [Presentation] 変異型特異的配列による変異型CALRの細胞内局在の規定. (2019)
  • Author(s): 水上喜久, 荒木真理人, 今井美沙, 林絵里奈, 増渕菜弥, 楊印杰, 木原慶彦, 弘中由美, 大坂顯通, 小松 則夫.
  • Organizer: 第29回日本サイトメトリー学会学術集会
• [Presentation] JAK2 exon 12変異およびSF3B1 変異を有する MDS/MPN-RS-T における 腫瘍クローンの様相の解明. (2019)
  • Author(s): 稲野資明, 荒木真理人, 森下総司, 今井美沙, 新田英昭, 伊藤雅文, 福田泰隆, 大坂顯通, 小松則夫.
  • Organizer: 第29回日本サイトメトリー学会学術集会
• [Presentation] calreticulin変異による骨髄増殖性腫瘍発症の分子メカニズム. (2019)
  • Author(s): 荒木真理人, 楊印杰, 増渕菜弥, 林英里奈, 水上喜久, 木原慶彦, 今井美沙, 弘中由美, 橳島麻衣, 枝廣陽子, 大坂顯通, 小松則夫.
  • Organizer: 第29回日本サイトメトリー学会学術集会
• [Presentation] 分泌経路における変異型分子シャぺロンとサイトカイン受容体の会合による細胞の腫瘍化. (2019)
  • Author(s): 増渕菜弥, 荒木真理人, 木原慶彦, 楊印杰, 今井美沙, 水上喜久, 林英里奈, 弘中由美, 竹井拓, 枝廣陽子, 大坂顯通, 小松則夫.
  • Organizer: 第29回日本サイトメトリー学会学術集会