Functional analysis of nephrotic syndrome caused by TRPC6 gene mutation and new drug development

2018 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 17K16262
• Research Institution: Kobe University
• Principal Investigator: 中西 啓太 神戸大学, 医学研究科, 医学研究員 (00793712)
• Project Period (FY): 2017-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: 遺伝性ネフローゼ症候群 / ミトコンドリア機能異常 / TRPC6

Outline of Annual Research Achievements

これまで小児特発性ネフローゼ症候群のうち、ステロイド抵抗性ネフローゼ症候群の症例に関して、作成した遺伝子疾患パネルで次世代シークエンサーによる解析を行った。解析結果については、2018年6月に行われた日本腎臓学会学術集会で発表した。この研究結果から、日本における遺伝性のネフローゼ症候群の割合や、原因遺伝子の内訳を明らかにすることができた。
さらに、原因遺伝子の中でミトコンドリアの機能に係る遺伝子であるCOQ6やADCK4などの遺伝子異常を同定することができた。これらの患児については、補酵素であるCoQ10補充を開始することで、治療効果が見られることがこれまで報告されている。実際に、COQ6の既報の変異を認めた症例に対してCoQ10投与を始めたところ、蛋白尿が陰性化した。この結果については、2019年11月にアメリカ腎臓学会で発表を行った。また、同内容についてClinical and Experimental Nephrologyに発表した。
TRPC6変異に対するin vitro解析については、ヒト由来細胞に作成したcTRCP6配列を含むvectorをtransfectionさせ、Ca influxを行った。さらに、Larixyl Acetateを用いてCa influxを行い、細胞内のCa濃度上昇が抑制されることを確認した。
in vitroの実験についてはこれまで発表するにまでは至っていないが、今後変異を含んだcTRPC6をヒト由来細胞にtransfectionし、変異導入によりCa濃度の変動に変化が見られるかどうか確認していく予定である。

Research Products

• [Journal Article] Pair analysis and custom array CGH can detect a small copy number variation in COQ6 gene (2018)
  • Author(s): Nakanishi Keita、Okamoto Takayuki、Nozu Kandai、Hara Shigeo、Sato Yasuyuki、Hayashi Asako、Takahashi Toshiyuki、Nagano China、Sakakibara Nana、Horinouchi Tomoko、Fujimura Junya、Minamikawa Shogo、Yamamura Tomohiko、Rossanti Rini、Nagase Hiroaki、Kaito Hiroshi、Ariga Tadashi、Iijima Kazumoto
  • Journal Title: Clinical and Experimental Nephrology Volume: 23 Pages: 669～675
  • DOI: 10.1007/s10157-018-1682-z
• [Presentation] ステロイド抵抗性ネフローゼ症候群における網羅的遺伝子診断体制の構築 (2018)
  • Author(s): 中西啓太、 野津寛大、榊原菜々、長野智那、藤村順也、 堀之内智子、南川将吾、山村智彦、貝藤裕史、島友子、中西浩一、飯島一誠
  • Organizer: 第61回日本腎臓学会学術総会
• [Presentation] An Infantile Nephrotic Syndrome Case Caused by COQ6 Gene Defects Revealed by Pair Analysis and Custom Array CGH (2018)
  • Author(s): Keita Nakanishi, Kandai Nozu, Takayuki Okamoto, Asako Hayashi, Toshiyuki Takahashi, Nana Sakakibara, China Nagano, Junya Fujimura, Tomoko Horinouchi, Shogo Minamikawa, Tomohiko Yamamura, Hiroshi Kaito, Yuko Shima, Koichi Nakanishi, Kazumoto Iijima
  • Organizer: ASN Kidney Week 2018
  • Int'l Joint Research
• [Funded Workshop] ASN Kidney Week 2018 (2018)