2018 Fiscal Year Research-status Report
Activation of RNA editing is a novel mechanism that promotes invasive potential of cancer-associated fibroblasts in colorectal cancer
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17K16557
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
重安 邦俊 岡山大学, 医学部, 客員研究員 (70544071)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | RNA editing / 線維芽細胞 / 大腸癌 / 微小環境 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
１．癌関連線維芽細胞の免疫染色：大腸癌臨床検体において、癌関連線維芽細胞の免疫染色を行った。癌細胞のみならず、間質中の線維芽細胞と思われる紡錘型の細胞でもADAR1（RNA編集酵素）の発現上昇を認めており、癌微小環境中でのRNA編集の増加の可能性を示唆する内容であった。
２．大腸癌臨床検体でのRNA編集の解析：大腸癌臨床検体からRNAを抽出し、AZIN1のRNA編集を解析したところ、正常部よりも癌部での上昇を認めた。今年度はサンプル数を増やし解析してみたが、やはり同様の結果であった。免疫染色でのADAR1の発現上昇の結果合わせてみると、癌微小環境中では線維芽細胞においてもADAR1の発現が上昇しており、それに付随する形で、そのターゲットであるAZIN1のRNA編集が上昇しているものと思われた。
３．癌細胞の培養上清が線維芽細胞に及ぼす影響：癌細胞株の培養液を採取し線維芽細胞に反応させたところ、ADAR1の発現増加とAZIN1 RNA editingの上昇を認めた。ADAR1の発現上昇のメカニズムはまだはっきり解明できてはいないが、ADAR1がインターフェロン応答性の発現コントロールを受けていることから、何らかの液性因子の介在に伴う細胞間のクロストークが存在するものと思われる。
４．AZIN1 wild もしくはedited typeの発現プラスミドの導入：リポフェクション法を用い、AZIN1のwild もしくはedited typeの強制発現をin vitroで試みている。
また、現在までの内容で論文を作成した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
臨床検体の解析をほぼ終了し、in vitroの実験も順調に推移しているため。
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| Strategy for Future Research Activity |
WildもしくはEdited typeのAZIN1の強制発現を行い、機能解析を行う予定である。
このため、Wild typeのAZIN1とEdited typeのAZIN1の発現プラスミッドのトランスフェクションを開始している。
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| Causes of Carryover |
AZIN1強制発現の実験を次年度に繰り越したため。
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[Presentation] Activation of AZIN1 RNA editing facilitates and promotes invasive potential of cancer associated fibroblasts in colorectal cancer2019
Author(s)
Sho Takeda, Kunitoshi Shigeyasu, Yoshinaga Okugawa, Kazuhiro Yoshida, Yoshiko Mori, Shuya Yano, Kazuhiro Noma, Yuzo Umeda, Yoshitaka Kondo, Hiroyuki Kishimoto, Fuminori Teraishi, Hiroshi Tazawa, Shunsuke Kagawa, Ajay Goel, Toshiyoshi Fujiwara
Organizer
AACR Annual Meeting 2019
Int'l Joint Research
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