Functional analysis of lysophosphatidic acid in urothelial carcinoma and establishment of novel treatment.

2018 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 17K16804
• Research Institution: Fukushima Medical University
• Principal Investigator: 片岡 政雄 福島県立医科大学, 医学部, 助教 (90554204)
• Project Period (FY): 2017-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: 膀胱癌 / リゾリン脂質 / 浸潤 / 再発

Outline of Annual Research Achievements

筋層非浸潤性膀胱癌４９症例において、経尿道的膀胱腫瘍切除術後の摘出組織をリアルタイムＰＣＲ法と免疫組織化学染色法により解析した。膀胱癌組織においてリゾフォスファチジン酸受容体１（ＬＰＡ１）陽性所見を認める症例が認められた。また正常膀胱粘膜ではＬＰＡ３が陽性であった。さらに膀胱の正常粘膜においてＬＰＡ合成酵素であるＡｕｔｏｔａｘｉｎ（ＡＴＸ）の発現を確認した。また、筋層非浸潤性膀胱癌症例に筋層浸潤性膀胱癌１５症例も加えリアルタイムＰＣＲ法と免疫組織化学染色法にて解析を行った。筋層浸潤性膀胱癌で有意にＬＰＡ１発現が亢進していることを確認した。また、ＬＰＡ２、ＬＰＡ３は筋層浸潤性膀胱癌、筋層非浸潤性膀胱癌いずれにおいてもＬＰＡ１ほどの発現は認められなかった。膀胱癌細胞株Ｔ２４を用いたマトリゲルインベージョンアッセイ解析によると、生理的尿中濃度のＬＰＡによりＴ２４の浸潤能亢進が認められた。この浸潤能の亢進はｓｉＲＮＡによるＬＰＡ１のノックダウンやＬＰＡ１阻害剤であるＫｉ１６４２５により抑制された。ＬＰＡ存在下に膀胱癌細胞株Ｔ２４のラメリポディ アの形成が確認された。この形態学的変化はＬＰＡ１のノックダウンやＬＰＡ１阻害剤投与により抑制されることを確認した。膀胱癌細胞における接着能の解析のためゼラチンザイモグラフィーによるマトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰ）の測定解析を行った。Ｔ２４細胞株ではＭＭＰ２、ＭＭＰ９ともにＬＰＡ投与による発現の亢進は認められなかった。