子宮体部漿液性癌におけるレドックス制御機構と薬剤抵抗性の関連

2018 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 17K16827
• Research Institution: Yamagata University
• Principal Investigator: 小幡 美由紀 山形大学, 医学部, 非常勤講師 (70613066)
• Project Period (FY): 2017-04-01 – 2020-03-31
• Keywords: 子宮体部漿液性癌 / スルファサラジン / フェロトーシス / JNK / 酸化ストレス

Outline of Annual Research Achievements

本研究ではグルタチオン(GSH)産生阻害剤であるスルファサラジン(sulfasalazine; SAS)が子宮体部漿液性癌(uterine serous carcinoma;USC)における薬剤抵抗性を解除し、drug repositioningの観点からSASがUSCの対する新規治療薬となり得るかを検討することを目的としている。
これまでの研究で、子宮体部漿液性癌細胞株ではSASがpaclitaxelの殺細胞効果を高めること、その機序がアポトーシスではなく、新たな細胞死機構であるフェロトーシスが誘導されるためであることが明らかになった。
本年度はpaclitaxel感受性株(USPC1)とpaclitaxel耐性株(PTX1)ではSASの殺細胞効果がPTX1でより高かったことからこれら細胞株におけるフェロトーシス誘導機構に着目し、研究を行った。フェロトーシスが誘導にはROSの上昇とRas signalingの活性化が必要であると予測し、USPC1とPTX1におけるRas signaling経路の発現状況を検討したところ、USPC1と比較してPTX1でJNKの発現が高かった。次に我々は、PTX1においてsiRNAを用いてJNKをknockdownし、SAS投与による細胞増殖能と細胞死誘導の変化を検討した。PTX1においてJNKをknockdownすることでSASの細胞増殖抑制と死細胞誘導効果が阻害された。これらの結果からSASのフェロトーシス誘導機構はJNK signalingと関連しており、JNK signalingが増強している細胞ではよりSASの抗腫瘍効果が高い可能性があることが明らかになった。
さらに、現在レドックス機構と婦人科がんの関連を検討するため、当施設倫理委員会の承認を受け、臨床検体を使用して酸化ストレスと還元力の検討を行っている。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

子宮体部漿液性癌細胞株においてSASによるフェロトーシス誘導機序はRsa signalingの下流に位置するJNK signalingと関連しており、JNK signalingが増強している細胞ではよりSASの抗腫瘍効果が高い可能性があることが明らかになった。
子宮体部漿液性癌においてSASがpaclitaxelの感受性を増強し、SASによってフェロトーシスが誘導されること、その誘導機序にJNK signalingが関連することが明らかとなり、現在、論文投稿中である。

Strategy for Future Research Activity

In vitroの研究はすでに終了した。マウスを用いたin vivoの研究も行ったが、子宮体部漿液性細胞株では腫瘍形成が認められず、実験が滞っている状況である。今後は、マウスをより免疫寛容のあるSCIDマウスへの変更やマウスに接種する漿液性細胞株の変更を行い、SASの効果をin vivoでも検討する予定である。また、倫理委員会承認後、SASの効果と関連が予測される因子（xCT, CD44, JNKなど）の発現と化学療法感受性や予後との関連について臨床検体を用いて検討する予定である

Causes of Carryover

In vitroでの検討が主であったため。次年度使用額としては、in vivoの実験を行うためのマウス購入、飼育費や抗がん剤などの薬剤購入費、免疫組織染色を行うための抗体購入費として使用予定。また、酸化ストレスデータ解析用としてコンピューター購入に使用予定である。