2017 Fiscal Year Research-status Report
Search for the TLR4 inhibitor as a novel treatment strategy for preterm birth
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17K16847
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Research Institution | Kyoto University |
Principal Investigator |
千草 義継 京都大学, 医学研究科, 助教 (80779158)
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Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2019-03-31
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Keywords | 早産 / 羊膜 / TLR4 |
Outline of Annual Research Achievements |
早産は新生児死亡、後遺症の重要な原因であり、早産の予防・治療は周産期医学領域における喫緊の課題である。早産の病態には子宮内における感染と炎症が深く関与している。本研究ではヒト羊膜間葉細胞において、Toll-like receptor 4(TLR4)の活性化を阻害することで、炎症(子宮頸管熟化・子宮収縮)およびコラーゲン分解(羊膜破綻)を抑制し、早産治療に資する薬剤の発見と効果判定を行うことを目的とした。 まず、アメリカ合衆国テキサス大学(Southwestern Medical Center)と協同し、High Throughput Screeningを行い、8320の化合物ライブラリーの中から、候補となる化合物6種(化合物A~Fとする)を同定した。これらの化合物はTLR4, MD2を安定的に発現させたHEK細胞(HEK-Blue-hTLR4細胞)において、EDAによるTLR4の活性化を強く阻害し、かつ細胞毒性のないものである。 まず、6種類の化合物がHEL細胞におけるTLR4の活性化をどれくらい抑制するかを化合物濃度を変えて検討したところ、50%阻害濃度(IC50)は、1.46±1.49 μMであり、化合物C(Econazole nitrate)、化合物D(Parthnolide)のIC50はそれぞれ0.30 μM、0.31 μMと最も低かった。したがってこれら化合C,Dが有力な候補化合物であると判断できた。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
ヒト羊膜間葉細胞においてTLR4とEDAとの相互作用を阻害する化合物を具体的に6種類同定し、さらに、IC50を算出することで、その中でもpotentかつpromisingな化合物を2つまで絞りこめた。
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Strategy for Future Research Activity |
これまでの実験で得られた2種類の化合物を実際のヒト羊膜間葉細胞に作用させてTLR4阻害効果があるかどうか、また妊娠マウスに投与したときの早産予防効果があるかどうかを確認していく予定としている。
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Causes of Carryover |
一部実験試薬、培養試薬が値下げされ、当初の予定よりも低価格で購入が可能となったため。 次年度に購入する実験試薬に充当の予定である。
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