2020 Fiscal Year Annual Research Report
Regenerative effect of a ROCK Inhibitor, Y-27632, on excitotoxic trauma in an organotypic culture of the cochlea
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17K16887
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| Research Institution | Yamagata University |
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Principal Investigator |
小泉 優 山形大学, 医学部, 非常勤講師 (80723585)
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2017-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | 内耳 / 感音難聴 / cochlear synaptopathy / 聴神経 / シナプス / ROCK阻害薬 / 聴覚再生 / 器官培養 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
現在、内耳再生に関する研究領域において聴神経の障害が注目されている。これまで感音難聴の成因に関する研究から、有毛細胞の障害が主な原因であると考えられていたが、近年になりいくつかの病態においては有毛細胞の障害よりも前に聴神経の障害（聴神経-有毛細胞間シナプスの障害）が起こっていることが確認されたためである。
本研究では蝸牛器官培養系を用いて聴神経障害モデル（聴神経線維および聴神経-有毛細胞間シナプスが障害され、聴神経の胞体および内外有毛細胞は残存している状態）を作製し、聴神経の再生を試みる。
wangらの報告を基に、NMDA 0.5 mMとKainic acid 0.5 mMの2種類の薬剤 (NK処理) を使用し、培養液中で2時間反応させることで聴神経障害モデルの作成を試みた。コラーゲンコートもしくはpoly-L-lysine+Lamininコートによる接着培養、コラーゲンゲルによる3次元培養、コーティングなしでの単純培養などの培養方法を用いて、聴神経障害モデルを作製したところ、いずれの培養方法においても、聴神経線維および聴神経-有毛細胞間シナプスが障害され、聴神経の胞体および内外有毛細胞は残存している状態が再現できた。
また、神経保護効果および神経・シナプス再生作用を有するとされるRho associated coiled-coil containing protein kinase (ROCK) 阻害薬を聴神経障害モデルに作用させることで、一度障害された聴神経が伸長している可能性が示唆された。また、本年度の研究により、ROCK阻害薬によるシナプス再形成の可能性も示されるとともに、PCR解析により、障害された神経において、Rho-ROCK経路が活性化している可能性が示された。本研究成果により国際論文を行い、本プロジェクトを完了した。
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