NAD中間代謝産物を用いた加齢性難聴の発症防止に関する研究

2017 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 17K16928
• Research Institution: Kumamoto University
• Principal Investigator: 山田 卓生 熊本大学, 医学部附属病院, 非常勤診療医師 (90573593)
• Project Period (FY): 2017-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: 加齢性難聴 / Sirtuins / NMN / NR

Outline of Annual Research Achievements

加齢性難聴は加齢に伴い進行する両側性の感音難聴である。コミュニケーション障害をきたすだけでなく、近年の研究により高齢者の認知機能低下にも悪影響を及ぼすことが明らかとなってきている。我が国における急速な人口の高齢化を考慮すると、加齢性難聴は今後ますます深刻な社会問題となってくると考えられるが、その発症メカニズムについても未だ明らかでなく、治療についても確立した方法がないのが現状である。
脱アセチル化酵素であるSirtuinsは細胞の老化及び加齢関連疾患においての極めて重要な役割を担っており、そのSirtuinsの発現はその補酵素であるNAD(nicotinamide adenine dinucleotide)に依存していることが知られている。近年の研究の進展により、NADの中間代謝物質の投与により加齢性変化を改善することができることが“内耳以外のいくつかの臓器”で明らかにされてきている。一方、蝸牛においては、蝸牛内にSirtuinが存在し、それが加齢に伴って低下することは報告されているが、NADの中間代謝物質の投与により蝸牛の加齢性変化が抑制されるかどうかについては未だ不明である。そこで、本研究においては加齢性難聴マウスモデルを用いてこのことを明らかにし、ヒト加齢性難聴の治療法開発の一助となることを目指す。
今回、1ヶ月齢（難聴出現前であることが知られている）と3ヶ月齢の加齢性難聴モデルマウス（C57BL/6マウス）に対して、NMN飼料：30mg、60mg、120mg、240mg /kg/dayおよびNR飼料：60mg、120mg、240mg、400mg /kg/dayをそれぞれ10日間連日投与し、その後、蝸牛におけるNAD、Sirtuins (SIRT1, 2, 3, 4, 5, 6, 7)の発現量をリアルタイムPCR法にて測定し、効率的に蝸牛内のNAD発現を増加できるNMN、NR含有量を決定した。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

NMN飼料、NR飼料の作成に予想以上に時間がかかり、飼料保存場所の確保にも時間を要したため。また、リアルタイムPCRのProbeの納入にも遅れが生じた。コントロールProbeについても発現が不安定であり、条件検討に時間を要した。

Strategy for Future Research Activity

各々の飼料を、加齢性難聴モデルマウスであるC57BL/6マウスに投与開始し、6か月後に評価を行う。
また、内耳特異的Sirtuin欠失加齢性難聴モデルマウスの作成を開始するために、Pax2-creマウスとSirtuin floxedマウスの産子を行う。

Causes of Carryover

前年度は予備実験で、飼料の量の調整を行ったものであったが、リアルタイムPCRによる評価に時間を要したため。
本年度には、遺伝子変異マウス作成のための2種類のマウスの産子および6か月分の飼料の購入を行い、飼料投与を開始する。