熱傷・褥瘡におけるS1P外用治療のマクロファージ活性および治癒促進効果

2018 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 17K17037
• Research Institution: Nippon Medical School
• Principal Investigator: 柘植 琢哉 日本医科大学, 医学部, 助教 (40774352)
• Project Period (FY): 2017-04-01 – 2020-03-31
• Keywords: 熱傷 / 褥瘡 / スフィンゴシン1リン酸(S1P)

Outline of Annual Research Achievements

ラットdeep dermal burn (DDB)モデルを作成し、スフィンゴシンー1リン酸 (S1P)外用の創傷閉鎖における効果を検討した。ラット背部に、直径1cmの円形のDDB を4か所作成し、1日おきにコントロールまたはS1P外用治療および フィルムによる密閉ドレッシングを行った。画像解析ソフトを用いて熱傷エリア解析を行った。S1P外用を行った熱傷は、コントロールと比較して、有意に創傷閉鎖が促進された (p=3.55x10-49 )。 次に、受傷および治療開始7日目における、光超音波イメージングを使用した血流・血管新生解析を行った。また、創部をサンプルとして回収し、血管内皮の マーカーであるCD34の免疫染色にて、新生血管の数を解析した。免疫染色の結果、1視野あたりの新生血管の数は、S1P外用を行った熱傷で有意に多かった (p=0.010)。また、光超音波イメージングの結果、S1P群のシグナルはコントロール群と比較して、強度・密度が有意に大きかった。さらに、我々は、受傷後7日目における創表面を壊死組織が、S1P群で少ないことに着目した。これについて、2つの仮説を立てた; 1.S1Pはマクロファージ分画M1を誘導し、壊死組織融解の促進に寄与する。2.S1Pは、S1Pレセプターシグナリングにより、組織障害を促進する一酸化窒素産生酵素 (iNOS)を制御し、組織保護に貢献する。1の仮説について、受傷後7日目で熱傷組織を採取し、細胞を分離し、フローサイトメトリーを用いてマクロファージ分画の解析を行った。同時に、マクロファージのマーカーであるF4/80の免疫染色も行い解析中を行った。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

当初の計画されていた実験や追加で予定した解析は概ね完了した。今後追実験を行う必要があるが、予定どおり概ね順調に進んでいると考えている。

Strategy for Future Research Activity

当初予定されていた計画は概ね完了している。現在論文作成中である。今年度は追加実験を行い、論文の出版を目指す。

Causes of Carryover

当初からの計画通りに研究が行えているが、追加実験の必要があり、試薬などの消耗品の不足分を購入する必要がある。また、本研究で得られた結果に関して、今後も国内外での発表を予定している。