2018 Fiscal Year Annual Research Report
Trial of jaw bone regeneration based on Notch signal regulation of iPS cells
Project/Area Number |
17K17148
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Research Institution | Tohoku University |
Principal Investigator |
鎌野 優弥 東北大学, 大学病院, 助教 (70757260)
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Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2019-03-31
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Keywords | iPS細胞 / Notchシグナリング |
Outline of Annual Research Achievements |
前年度に樹立したドキシサイクリンを用いてNotchシグナル制御を可能とするNICD遺伝子発現制御性iPS細胞株の解析を行った。具体的には1 ug/mlの濃度でドキシサイクリンを加えることにより、NICD1の遺伝子およびタンパク質発現を検討し、コントロールが可能であることを確認した。また、NICD1の下流で働くHes1, Hes5, Hey1,およびHeyLの発言を検討した結果、Hes5およびHey1の遺伝子発現が有意に上昇することが明らかになった。これにより、ドキシサイクリンによりiPS細胞内のNotchシグナリングが調整できること示唆された。 次に、樹立したiPS細胞をドキシサイクリン存在下でGrowth mrdiumおよびOsteogenic mediumを用いて培養した結果、ドキシサイクリンを加えたOsteogenic mediumで培養した群において多野郡では見られなかった、バブル状の形態を持つ構造物が見られた。Notchシグナルは神経提細胞分化に重要な因子であることから、外胚葉系の組織への分化を誘導した可能性が示唆される。今後、この細胞についてさらに遺伝子およびタンパク質の解析を続ける予定である。 さらに、同様の培養方法を用いて、骨芽細胞分化を検討した。von Kossa染色およびAlizarin red染色を用いて評価した結果、ドキシサイクリン存在下、非存在下では有意な差は認められなかった。一方で、ドキシサイクリンを短期間のみ作用させた群においては僅かながら骨芽細胞分化の亢進が認められた。この現象に関しても更なる検討を進めていく予定である。
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