2018 Fiscal Year Research-status Report
Development of the cure for aspiration-related pneumonia using condition media from stem cells from human exfoliated deciduous teeth
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17K17241
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
椙村 有紀子 名古屋大学, 医学部附属病院, 医員 (10778658)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 培養上清 / 乳歯歯髄幹細胞 / パラクライン因子 / 誤嚥性肺炎 / 嚥下障害モデル / マクロファージ |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究の構想は、ヒト乳歯歯髄幹細胞（SHED）が分泌するパラクライン因子に含まれる嚥下障害改善に関係する因子を調べ、その因子群を嚥下障害モデルに適用し、治療効果について検討することである。
本年度は、動物実験を中心に研究を進めた。近年、上喉頭神経が嚥下を誘発する受容器を支配していることがわかっている。そのため、ラットの上喉頭神経を圧挫し、嚥下障害モデルが確立できるのか検証した。圧挫方法は、フォーセップスで10秒、10秒×2回、10秒×3回の3通りを行い、健常ラットと嚥下回数で比較検討した。結果は、10秒、10秒×2回では嚥下回数にばらつきがでてしまった。10秒×3回行うと嚥下回数にばらつきも少なく、健常ラットと比較し優位に嚥下回数が減少していた。この実験結果をうけて、ラットの上喉頭神経をフォーセップスにて10秒×3回圧挫を行いモデルを確立した。次に、培養上清（CM）の治療効果の検証を行った。上喉頭神経を圧挫後、CMを頸静脈より全身投与した。対照群には無血清DMEMを頸静脈投与した。嚥下回数は対照群と比較し、CM投与群では有意に増加していた。また、ピオクタニン希釈液を2分間摂水させ、摂水量や喉頭の染色域の面積を比較した。対照群と比較し、CM投与群では摂水量は有意に増加し、喉頭の染色域は有意に小さかった。これらのことより、SHED-CMの頸静脈投与は、嚥下障害の治療法となりうる可能性が示唆された。
産前産後休暇を取得したため10月から1月まで中断した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
実験計画が遅れた最大の理由は、ラット嚥下障害モデルの作製方法の報告は少なく、確立するのに時間を要したことが挙げられる。また、産前産後休暇を取得したため一時実験を中断したため遅れが生じた。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後は、嚥下障害モデルに対する培養上清のメカニズムを検討する。具体的には、損傷を受けた神経の遺伝子学的変化をリアルタイムPCR法にて定量化する。遺伝子としては、炎症性サイトカインであるTNF-α、IL-1β、IL-6、抗炎症性サイトカインであるIL-10、TGF-βを考えている。肺の炎症変化についてもH-E染色で確認をする。
また、最適な培養上清の投与時期や投与量についても検討をする。
これらの結果をまとめて論文発表を行う。
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| Causes of Carryover |
産休中、実験が行えなかったため次年使用額が生じた。
使用計画としては、動物実験、英文校正、論文投稿費に使用する。
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