2017 Fiscal Year Research-status Report
ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体を介した麻酔薬の抗炎症作用の解明
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17K17248
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
若杉 優花 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 助教 (00749210)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | デクスメデトミジン / ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体γ |
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| Outline of Annual Research Achievements |
我々は、デクスメデトミジン（DEX）がアラキドン酸代謝の過程で生じる15-デオキシ-△12, 14-PGJ2（15d-PGJ2）の産生を増加させ、これがペルオキシソーム増殖因子活性化受容体γ（PPARγ）および核内転写因子（NF-κB）による転写活性を抑制し、炎症性サイトカインの産生を抑制するという仮説を立てている。H29年度は、これまでに報告しているDEXの抗炎症作用をさらに検証した。マウスマクロファージ由来株細胞のRAW264.7を用い、Lipopolysaccharide (LPS) により炎症を惹起し、DEXを投与することでTNF-αの産生抑制が認められるかを調べた。細胞を調整し、LPSのみ投与する群（LPS: 10ng/ml n=5） 、LPS＋DEX投与群 (LPS: 10ng/ml、DEX: 0.1, 1, 10, 50μM 各n=5) の5群に分けた。2, 4, 6時間後、上清を回収し、ELISAでTNF-αの濃度を測定した。2時間後では、有意な変化は認められなかった。しかし、４時間後ではLPS+DEX1, 10, 50μM群において、また６時間後ではLPS+DEX10, 50μM群において有意にTNF-αの産生抑制が確認された。
次に、15d-PGJ2の測定を行った。同様に、細胞を調整し、Control群（培地のみ n=5）、LPSのみ投与する群（LPS: 10ng/ml n=5） 、LPS＋DEX投与群 (LPS: 10ng/ml、DEX: 3, 10μM 各n=5) 、DEXのみ投与する群（DEX: 10μM n=5）の5群に分けた。6時間後、上清を回収し、ELISAで濃度を測定した。その結果、LPS+DEX10μM群において有意に15d-PGJ2の産生増加が確認された。これにより、DEXの抗炎症作用に15d-PGJ2が関与している可能性が示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
予備実験後、各濃度を設定した後ELISAキットを用いて測定を行ったが、各群内でのばらつきが大きく、手技の安定までに時間を要した。
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| Strategy for Future Research Activity |
H30年度は、これまでの結果で確認できたDEXによる炎症性サイトカインの抑制が、各種拮抗薬を添加することにより影響を受けるかについて、ELISAやリアルタイムPCRで検討を行う。また、プロスタグランジンにおいても同様に検討を行う。以上で結果が得られれば、ヒトPBMCsでIn vitro実験の総括を行うか、あるいはラットを用いてIn vivo実験に移行し、DEXによる抗炎症作用の機序の解明に引き続き取り組んでいく予定である。
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