2018 Fiscal Year Annual Research Report
Functional analysis of heparin/heparan sulfate on regulation of B cell inhibitory receptor CD72
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17K17695
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| Research Institution | Tokyo Medical and Dental University |
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Principal Investigator |
赤津 ちづる 東京医科歯科大学, 難治疾患研究所, 助教 (60735984)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | 免疫学 / B細胞 / 自己免疫 / レクチン / CD72 / 硫酸化糖鎖 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、主にB細胞表面に発現し、全身性エリテマトーデスの発症抑制に関わる抑制性分子、CD72による硫酸化糖鎖リガンド認識の意義の解明を目的として行った。CD72は、細胞外領域にC型レクチン様領域（CTLD）を持ち、Hisタグを付加したマウスCD72CTLDの組換えタンパク質を用いた予備的な実験において、CD72が一部の硫酸化糖鎖と結合することを見出していた。この結合性におけるHisタグの影響を排除するため、昨年度Hisタグを除去した組換えCD72CLTDタンパク質の大腸菌での産生方法を新たに確立したので、本年度は新たな組換えタンパク質を用いて、ELISA法により糖鎖リガンドとの結合性を解析した。なお、マウスCD72の多型のうち正常型CD72aとSLE発症関連型CD72cの組換えタンパク質の産生を試みたが、CD72cは産生に成功しなかったため、CD72aCTLD組換えタンパク質を用いて様々な糖鎖リガンドとの結合性を解析した。その結果、調べた全ての糖鎖リガンドに対してCD72aCTLDの結合性は検出されなかった。一方、FLAGタグを付加したCD72aおよびCD72cを強制発現させたマウスミエローマ細胞を、硫酸化阻害薬である塩素酸ナトリウムで処理した後OptiprepTM密度勾配遠心で分画すると未処理の細胞に比べて細胞膜上に分画されるCD72の割合が増加していた。したがってCD72の細胞内移行は硫酸化糖鎖以外の硫酸基を有する分子により制御されている可能性が示唆された。
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[Journal Article] CD22-Binding Synthetic Sialosides Regulate B Lymphocyte Proliferation Through CD22 Ligand-Dependent and Independent Pathways, and Enhance Antibody Production in Mice.2018
Author(s)
Matsubara N, Imamura A, Yonemizu T, Akatsu C, Yang H, Ueki A, Watanabe N, Abdu-Allah H, Numoto N, Takematsu H, Kitazume S, Tedder TF, Marth JD, Ito N, Ando H, Ishida H, Kiso M, Tsubata T.
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Journal Title
Front Immunol
Volume: 9
Pages: 820
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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