肺指向性ナノパーティクルPNAG-DNAワクチンによる肺感染症の発症／重症化予防

2017 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 17K17950
• Research Institution: Nagasaki University
• Principal Investigator: 賀来 敬仁 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 助教 (40770491)
• Project Period (FY): 2017-04-01 – 2020-03-31
• Keywords: 重症感染症 / 肺炎 / ワクチン

Outline of Annual Research Achievements

黄色ブドウ球菌ATCC株からcDNAを抽出し、PCRを施行した。増幅産物を1%agarose gelで電気泳動し、目的とする増幅産物が得られたことを確認して精製を行った。精製後に制限酵素で切断し、プラスミドベクターにライゲーション反応で連結した。大腸菌導入してプラスミドを増幅した。大腸菌から抽出したプラスミドについては、PCRを行い電気泳動でPNAG-DNAを組み込んだプラスミドが増幅されたことを確認した。このPNAG-DNAプラスミドを用いてPNAG-DNAワクチンが生成できた。精製したPNAG-DNAワクチンをESBL-Kpn肺炎マウスモデルに投与したところ、死亡までの平均時間がControlで38.0±4.9時間であったのに対して、PNAG-DNAワクチン投与群では58.0±27.8時間と生存期間を延長できた。
今回の検討ではESBL-Kpn肺炎マウスモデルにおいて生存期間を延長したため、ワクチンの投与効果はあったと考えられる。しかし、感染108時間の時点で生存率が0%となったため、救命するまでの効果は認められなかった。これは、マウスに高菌量を投与して作成する肺炎マウスモデルであったことも影響していると考えられる。今後は、PNAG-DNAワクチンに最適なベクターの選定を再度行うとともに、菌を鼻腔に定着させて肺炎を起こす肺炎球菌肺炎マウスモデルを使用した検討やその他の肺炎マウスモデルを用いた検討も行う。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

PNAGワクチンを精製するのに時間を要したが、重症感染症マウスモデルにおける検討まで行うことができた。

Strategy for Future Research Activity

今後は、PNAG-DNAワクチンに最適なベクターの選定を行うとともに、菌を鼻腔に定着させて肺炎を起こす肺炎球菌肺炎マウスモデルを使用した検討も行う。