2018 Fiscal Year Research-status Report
糖鎖・Toll様受容体アゴニスト固定化金ナノ粒子を用いたがんワクチンの開発
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17K17968
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| Research Institution | Kagoshima University |
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Principal Investigator |
新地 浩之 鹿児島大学, 理工学域工学系, 助教 (70770155)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | TLR / 糖鎖 / 金ナノ粒子 / アジュバント / ワクチン |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、Toll様受容体（TLR）アゴニストと糖鎖抗原を固定化した金ナノ粒子を用いたがんワクチンを開発することを目的としている。
2年目は、合成低分子TLR7リガンドの1V209と免疫細胞に輸送するためのαマンノースを固定化した金ナノ粒子（1V209-αMan-GNP）の１）in vitroでの免疫増強活性（アジュバント活性）評価と２）細胞毒性評価及び３）in vivoでのアジュバント活性評価を行った。
1V209-αMan-GNPのin vitroでのアジュバント活性をJ774A.1とマウス骨髄由来樹状細胞（BMDC）を用いて評価したところ、マンノース受容体を発現しないJ774A.1ではほとんどサイトカインが産生されず、マンノース受容体を多く発現するマウス骨髄由来樹状細胞（BMDC）では、1V209誘導体単体に比べ、高いサイトカイン産生能を示した。したがって、マンノース受容体が1V209-αMan-GNPの細胞内移行に重要な受容体の一つであることが示唆され、1V209誘導体のGNPへの固定化によりサイトカイン産生能が向上することを見出した。次いで、ヒト細胞でのアジュバント活性を、末梢血単核細胞を用いて評価したところ、1V209誘導体単体に比べて高いサイトカイン産生能を示したことから、ヒトにおいても有用であることが示唆された。また、いずれの細胞でも細胞毒性は認められなかった。
モデル抗原にオボアルブミン（OVA）を用いて、in vivoでのアジュバント活性を評価したところ、IgG2c抗体の産生価が1V209単体に比べて10,000倍高い一方で、脾臓が全く腫れない等、炎症性が低かった。即ち、1V209-αMan-GNPはin vivoでも高いアジュバント活性を有しており、安全に利用できることが示された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
2年目は、糖鎖・TLR7アゴニスト固定化金ナノ粒子のin vitroでの免疫増強活性（アジュバント活性）評価と金ナノ粒子上に固定化する糖鎖抗原・TLR7アゴニストの固定化量・比率の最適化について検討する予定であったが、初年度に計画が順調に進展し、前倒しで研究が実施できたため、最終年度に実施予定であった、in vivoでのアジュバント活性評価を前倒しで実施することができた。これらの成果で、特許の優先権主張出願を行い、第24回日本エンドトキシン・自然免疫研究会にて口頭発表を行うことで、成果を公表した。
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| Strategy for Future Research Activity |
最終年度は、アジュバントとなる1V209とモデル糖鎖抗原となるシアリルTn抗原等の糖鎖抗原を固定化したGNPを調製し、in vivoでの糖鎖抗原に対する抗体産生能やワクチン活性の評価を計画している。
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