2018 Fiscal Year Research-status Report
質量分析法を用いた薬剤耐性菌の検出と代謝メカニズムの解明
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17K18199
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| Research Institution | Tokyo Health Care University |
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Principal Investigator |
松村 有里子 東京医療保健大学, 医療保健学研究科, 講師 (10439507)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 抗生物質 / 感染症 / 細菌 / 質量分析 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
抗菌薬の選択において、感染症を発症する原因菌の薬剤感受性結果が重要な一つの要素である。現在、検体提出から適切な抗菌薬の選択までには数日を要している。さらに、国際的に多剤耐性菌が問題となり、これまでに、抗菌薬に対する耐性機構が解明されつつあるものの、その全容は明らかとはなっていない。本研究では、基質特異性拡張型β-ラクタマーゼ(ESBLs)産生菌を対象に、マトリックス支援レーザー脱離イオン化飛行時間型質量分析法(MALDI-TOF-MS)を用いて、抗菌薬の化学構造変化と微生物由来の特徴的なスペクトルパターンをとらえ、 微生物同定と薬剤耐性の有無を迅速に判断することを目的としている。MALDI-TOF MSによる微生物同定は、臨床分野において２機種使用されており、いずれの装置でも適用可能な薬剤感受性試験系の確立を目指す。また、培養液の液体クロマトグラフ質量分析法(LCMS-IT-TOF)による分析を行い、時間依存的に変化する代謝物を多変量解析腫瘍を用いて解析する。
平成２９年度は、MALDI-TOF MSによる薬剤感受性試験系の確立を行うために、ESBLs産生菌と非産生菌の標準菌株、抗菌薬としてセフォタキシム、MALDI-TOF-MSには臨床で使用可能な微生物同定用質量分析装置であるVITEK MS Plusを用いて、詳細に実験条件を検討した。
平成３０年度は、平成２９年度に確立した薬剤感受性試験系が、臨床で使用できる微生物同定用質量分析装置として市販されている Bruker Biotyperを用いた場合でも適用可能かを検討するとともに、セフォタキシム以外のβラクタム系抗菌薬を用いた検討を行なった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
MALDI-TOF-MSによる薬剤感受性評価方法として、標準菌株を用いてセフォタキシム以外の抗菌薬に対する検討を行い、臨床分離株に対する展開に着手し、感受性評価法の確立は概ね予定通りに進行している。しかし、LCMS-IT-TOFを用いた代謝物解析に関する研究は、装置のメンテナンスに時間を要し、着手できていない。
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| Strategy for Future Research Activity |
2019年度は、平成30年度に引き続き臨床分離株を用いた検討を行い、確立した薬剤感受性評価方法と従来法との比較から、感度、選択性等を詳細に検討する。LCMS-IT-TOFを用いた代謝物解析では、代謝物解析に適したLC条件の設定とMS測定条件の設定を行い、培養時間依存的な培養成分の濃度変化の追跡を行う。
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| Causes of Carryover |
平成30年度に予定していたLCMS-IT-TOFを用いた代謝物解析に着手できなかったため、次年度への繰越金が発生したが、2019年度に同研究の消耗品費として使用する。また、翌年度分として請求した助成金は、MALDI-TOF MSによる薬剤感受性試験に必要な消耗品費、2019年度実施予定であった液体クロマトグラフィーを用いた培養成分の分析に関連する消耗品費、および成果報告に要する旅費、学術雑誌への投稿料として使用する。
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