2018 Fiscal Year Annual Research Report
A therapeutic strategy for human hepatocellular carcinoma using "armed" oncolytic herpes simplex viruses.
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17K18252
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| Research Institution | Kansai Medical University |
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Principal Investigator |
中竹 利知 関西医科大学, 医学部, 助教 (40779401)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | 肝細胞癌 / 第三世代制限増殖型遺伝子組換えHSV－1 / G47Δ / IL-12 / 可溶型B7-1 / ウイルス療法 / 抗腫瘍免疫 / 免疫チェックポイント阻害薬 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
(1)T-B7-1, T-mfIL12の効果検討
in vitroにおいてT-01と比較し、T-B7-1, T-mfIL12のマウス肝癌に対する抗腫瘍効果と複製能の確認した。また動物実験では、in vitroで認めた基本的な殺細胞能力に加え、抗腫瘍免疫を介した抗腫瘍効果を評価した。
①in vitro：ヒト肝細胞癌細胞株HuH-7ならびにマウス肝癌細胞株Hepa1-6に対して、T-mfIL12, T-B7-1の抗腫瘍効果と複製能の確認を行った。
T-B7-1, T-mfIL12の抗腫瘍効果はMOI:0.01ならびに0.1において、T-01と同等の効果を有した。またMOI:0.01における低濃度感染後48時間経過したT-mfIL12, T-B7-1のウイルス複製能に関してもT-01と同等であった。
②in vivo：マウス肝癌Hepa1-6両側側腹部皮下移植腫瘍モデル(C57BL6マウス, 5.0x106 cells)における、T-B7-1,T-mfIL12の直接治療効果ならびに非接種部位に対する特異的抗腫瘍免疫効果の検討を行った。
両側皮下腫瘍を目視確認後（腫瘍径0.5cm）、T-01,T-B7-1,T-mIL12（2×105pfu/回）を片側腫瘍内に投与し（day 0,3）、投与後28日間の体積変化を確認した。ウイルス接種側の皮下腫瘍に関して、mock群に対しT-01,T-B7-1,T-mIL12群は有意に腫瘍縮小効果を認め、ほぼ腫瘍が消退した。またウイルス非接種側では、mockならびにT-01群に対して、T-B7-1ならびにT-mIL12群は有意に腫瘍縮小効果を認め、ほぼ腫瘍が消退した。投与後28日に両側皮下腫瘍が消退したT-B7-1,T-mIL12群のマウス(各群n＝10)に対し、再度Hepa1-6（5.0x106 cells）を背部皮下に移植し、30日経過観察を行なった(Rechallenge assay、対照群は同週齢の同マウス(n＝10))。再移植後30日の時点で、腫瘍の生着はT-B7-1,T-mIL12群は各々0/10匹であり、対照群は6/10匹であった。T-B7-1,T-mIL12接種後の特異的抗腫瘍免疫効果によって、抗腫瘍免疫が惹起され皮下腫瘍の生着が阻害されたと考えられた。
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