New screening methods for inhibitor of bovine leukemia virus using Luminescence Syncytium Induction Assay (LuSIA)

2018 Fiscal Year Final Research Report

• Project/Area Number: 17K18356
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Research Field: Integrative animal science; Virology
• Research Institution: Institute of Physical and Chemical Research
• Principal Investigator: Sato Hirotaka 国立研究開発法人理化学研究所, 開拓研究本部, 研究員 (00708539)
• Project Period (FY): 2017-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: 牛白血病ウイルス / ウイルス感染阻害剤 / 薬剤スクリーニング / LuSIA

Outline of Final Research Achievements

We established new cell line,CC81-GREMG, to construct sensitive method of bovine leukemia virus (BLV) replication inhibitor. We start the screening using this method and 400 compounds of pilot library presented by RIKEN NPDepo. In the result, we got 16 hit compounds, which showed over 90% of viability and over 30% inhibition of fluorescence syncytium formation. Furthermore, 6 compounds within the 16 hit compounds showed dose dependency at 10 to 0.1ug/mL. To find highly active analogs and confirm the their activity, we are screening the analog library of 6 hit compounds. finally, we confirmed 4 highly active analogs from hit compound A, B, C and E, and these structures showed structure-activity relationships.

Free Research Field

細胞生物学

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

高感度な第2世代レポーター細胞CC81-GREMGを開発したことにより、BLV感染性阻害スクリーニングの感度が向上し、多くの阻害剤候補を得ることに成功した。今回得られた高感度感染性測定法は、薬剤スクリーニングのみならず混入ウイルスの検出など幅広い活用が見込まれる。牛白血病ウイルスの複製を阻害する活性を持つ候補化合物はそれぞれ基本構造が異なっており、類縁体化合物のスクリーニングを行ったことで、より活性の高い化合物をそれぞれ見いだすことに成功した。今後は、最も活性の強い類縁体を用いて機能解析を進めていくことで、作用機序の解明および牛白血病治療法開発への応用が期待される。