2017 Fiscal Year Research-status Report
Elucidation of mechanisms of prionoid conversion of alpha-synuclein by imaging mass spectrometry
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17K19658
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
永井 義隆 大阪大学, 医学(系)研究科(研究院), 教授 (60335354)
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| Project Period (FY) |
2017-06-30 – 2019-03-31
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| Keywords | 脳神経疾患 / 蛋白質 / 脂質 / 分析科学 / 質量顕微鏡 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、パーキンソン病（PD）、レビー小体型認知症（DLB）、多系統委縮症（MSA）などのシヌクレイノパチーにおけるαSynの凝集・プリオノイド化の誘因として脂質に着目し、αSynのプリオノイド化、脳内伝播メカニズムを解明することを目的として、以下の研究を行った。
１）質量分析イメージングを用いたレビー小体に蓄積する脂質成分の同定
シヌクレイノパチー患者脳内のレビー小体において、αSynと共に蓄積している脂質成分を同定することを目的として、連携研究者の瀬藤光利博士との共同研究にて、PD、MSA患者脳切片の質量分析イメージング解析を試みた。その結果、レビー小体の同定のために免疫染色を行った固定標本では、安定した解析結果が得られないことが明らかになった。
２）αSynのプリオノイド化を規定する生体内脂質の同定
人工リポソーム脂質膜と精製αSynを用いたin vitroアッセイ系により、αSynの凝集・プリオノイド化に影響を及ぼす生体内脂質のスクリーニングを行い、αSynのプリオノイド化を促進するいくつかの脂質を同定した。また、αSynの生体内における動態を可視化するために、新規のレポーターショウジョウバエの作成を行った。
組織特異的特異的GAL4ドライバーによってGFP-αSynを発現するドナーショウジョウバエとElavプロモーター下に神経系全体にmCherry-αSynを発現するアクセプターショウジョウバエをそれぞれ複数系統が得られ、発現量解析結果から、αSyn伝播レポーターショウジョウバエとして最も適切な系統を選択した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
患者脳切片の質量分析イメージング解析の条件検討に時間がかかった。
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| Strategy for Future Research Activity |
患者の凍結脳切片を用いて、質量分析イメージング解析を行う。
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| Causes of Carryover |
質量分析イメージング解析が、当初の予定通りに進まなかった。凍結脳切片標本を用いて、再度質量分析イメージング解析を行う。
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[Journal Article] Overexpression of ter94, Drosophila VCP, improved motor neuron degeneration induced by knockdown of TBPH, Drosophila TDP-43.2018
Author(s)
Kushimura Y., Tokuda T., Azuma Y., Yamamoto I., Mizuta I., Mizuno T., Nakagawa M., Ueyama M., Nagai Y., Yoshida H., Yamaguchi M.
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Journal Title
Am. J. Neurodegener. Dis.
Volume: 1
Pages: 11～31
Peer Reviewed
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[Presentation] Regulatory role of RNA chaperone for noncoding repeat RNA aggregation and repeat-associated translation in SCA31.2017
Author(s)
Nagai Y., Ishiguro T., Sato N., Ueyama M., Fujikake N., Yokota T., Wada K., Mizusawa H., Ishikawa K.
Organizer
The 43rd Naito Conference on Noncoding RNA：Biology, Chemistry, & Diseases
Int'l Joint Research
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[Presentation] Transgenic monkey model of the polyglutamine diseases recapitulating progressive neurological symptoms and polyglutamine protein inclusions.2017
Author(s)
Nagai Y., Tomioka I., Ishibashi H., Minakawa E.N, Motohashi H.H., Takayama O., Saito Y., Popiel H.A., Puentes S., Owari K., Nakatani T., Nogami N., Yamamoto K., Noguchi S., Nagano S., Nishino I., Ichinohe N., Wada K., Kohsaka S., Seki K.
Organizer
The 23rd World Congress of Neurology (WCN 2017)
Int'l Joint Research
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[Presentation] Balance between RNA binding proetin TDP-43 and an RNA UGGAA repeat underlies pathogenesis of spinocerebellar ataxia type 31 (SCA31) and motor neuron disease fly models.2017
Author(s)
Ishiguro T., Sato N., Ueyama M., Fujikake N., Sellier C., Tokuda E., Zamiri B., Gall-Duncan T., Mirceta M., Furukawa Y., Yokota T., Wada K., Taylor J.P., Pearson C.E., Charlet-Berguerand N., Mizusawa H., Nagai Y., Ishikawa K.
Organizer
The 23rd World Congress of Neurology (WCN 2017)
Int'l Joint Research
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[Presentation] Parkinson’s disease-linked DNAJC13 mutation aggravates α-synuclein-induced neurotoxicity through perturbation of endosomal trafficking.2017
Author(s)
Hasegawa T., Yoshida S., Suzuki M., Sugeno N., Kobayashi J., Ueyama M., Ezura M., Kikuchi A., Baba T., Takeda A., Mochizuki H., Nagai Y., Aoki M.
Organizer
The 23rd World Congress of Neurology (WCN 2017)
Int'l Joint Research
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[Presentation] The search for genes that modulate FUS-mediated phenotypes by Drosophila amyotrophic lateral sclerosis model.2017
Author(s)
Azuma Y., Tokuda T., Kushimura Y., Yamamoto I., Yoshida H., Mizuta I., Ueyama M., Nagai Y., Nakagawa M., Mizuno T., Yamaguchi M.
Organizer
The 23rd World Congress of Neurology (WCN 2017)
Int'l Joint Research
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[Presentation] Loss of function mutant of ter94, Drosophila VCP, partially enhanced motor neuron degeneration induced by knockdown of TBPH, Drosophila TDP-43.2017
Author(s)
Kushimura Y., Tokuda T., Azuma Y., Yamamoto I., Yoshida H., Mizuta I., Ueyama M., Nagai Y., Nakagawa M., Mizuno T., Yamaguchi M.
Organizer
The 23rd World Congress of Neurology (WCN 2017)
Int'l Joint Research
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[Presentation] The search for genes that modulate FUS-mediated phenotypes by Drosophila amyotrophic lateral sclerosis model.2017
Author(s)
Azuma Y., Tokuda T., Kushimura Y., Yamamoto I., Ueoka I., Mizuta I., Mizuno T., Nakagawa M., Ueyama M., Nagai Y., Yoshida H., Yamaguchi M.
Organizer
CSHL 2017 Neurobiology of Drosophila
Int'l Joint Research
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[Presentation] Loss of function mutant of ter94, Drosophila VCP, partially enhanced motor neuron degeneration induced by knockdown of TBPH, Drosophila TDP-43.2017
Author(s)
Kushimura Y., Tokuda T., Azuma Y., Yamamoto I., Ueoka I., Mizuta I., Mizuno T., Nakagawa M., Ueyama M., Nagai Y., Yoshida H., Yamaguchi M.
Organizer
CSHL 2017 Neurobiology of Drosophila
Int'l Joint Research
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[Presentation] Regulatory role of RNA chaperone TDP-43 for RNA misfolding and repeat-associated translation in SCA31.2017
Author(s)
Ishikawa K., Ishiguro T., Sato N., Ueyama M., Fujikake N., Sellier C., Tokuda E., Zamiri B., Gall-Duncan T., Mirceta M., Furukawa Y., Yokota T., Wada K., Taylor J.P., Pearson C.E., Charlet-Berguerand N., Mizusawa H., Nagai Y.
Organizer
67th Annual Meeting of American Society of Human Genetics
Int'l Joint Research
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