2022 Fiscal Year Annual Research Report
Identification of novel osteoclast-osteoblast coupling factors in exosomes involving cell cycle machinery
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17K19746
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
小笠原 徹 東京大学, 保健・健康推進本部, 講師 (20359623)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
筑田 博隆 群馬大学, 大学院医学系研究科, 教授 (30345219)
茂呂 徹 東京大学, 医学部附属病院, 特任教授 (20302698)
阿部 雅修 東京大学, 医学部附属病院, 講師 (10392333)
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| Project Period (FY) |
2017-06-30 – 2023-03-31
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| Keywords | シグナル伝達 / 再生医学 / 発生・分化 / 細胞周期 / エクソソーム |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、エクソソームを介した細胞間情報伝達機構と細胞周期制御機構に着目して、破骨細胞ならびに骨芽細胞分化を統合的に制御する分子、すなわち、「新規骨代謝カップリング因子」の探索を行い、骨代謝メカニズムの理解を深めるとともに、その結果を利用した新規骨再生治療法開発に向けた基礎的検討を行うことを目的として企画された。マウス由来骨芽細胞と同破骨細胞を用いて、エクソソームを介した破骨細胞・骨芽細胞間情報伝達機構の存在確認と細胞周期制御ならびに細胞分化への関与を検討した。骨芽細胞については、通常培養と各分化段階（初期分化段階、中期分化段階、最終分化段階）の細胞からエクソソームを抽出した。また、破骨細胞については、破骨細胞前駆細胞通常培養、分化誘導直後、最終分化後、の各培養条件で培養した細胞からエクソソームを抽出した。骨芽細胞由来のエクソソームを各分化段階の破骨細胞へ、破骨細胞由来のエクソソームを各分化段階の骨芽細胞へ、それぞれ導入し、その後エクソソーム導入が細胞に与える影響を評価した。導入細胞における各種分化マーカーの発現と細胞周期制御分子の発現を定量RT-PCRで解析し、形態的な変化も観察した。しかしながら、明確にエクソソームを介した骨芽細胞・破骨細胞間情報伝達機構の存在を示す結果は得られなかった。そのため、small RNAシーケンスなどの網羅的な解析手法を用いて骨芽細胞由来のエクソソームに含まれるマイクロRNAで候補分子となるものを検索した。その結果、骨形成抑制に関わる可能性を持つマイクロRNAとして、mmu-miR-26a-5pなどの分子を、骨形成促進に関わる可能性を持つマイクロRNAとしては、mmu-miR-214-3pなどの分子を同定した。今後はさらなる機能解析を行う予定である。
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Research Products
(4 results)
