2018 Fiscal Year Research-status Report
NASHに対する腸内細菌と酸化ストレス応答性転写因子Nrf2の役割
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17K19888
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| Research Institution | University of Tsukuba |
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Principal Investigator |
鈴木 英雄 筑波大学, 医学医療系, 准教授 (00400672)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
柳川 徹 筑波大学, 医学医療系, 教授 (10312852)
磯辺 智範 筑波大学, 医学医療系, 教授 (70383643)
蕨 栄治 筑波大学, 医学医療系, 講師 (70396612)
正田 純一 筑波大学, 医学医療系, 教授 (90241827)
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| Project Period (FY) |
2017-06-30 – 2020-03-31
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| Keywords | NASH / LPS / 遺伝子改変マウス / 遺伝子レスキューマウス / 腸管透過性 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
DKOマウスにおけるNASH発症には，グラム陰性菌の増加と腸管上皮バリア機能の脆弱性によるLPSの肝への流入量の増加が重要である．
Nrf2遺伝子のイントロンに、LoxP配列で挟まれた転写終結シグナルおよびpolyA付加シグナル配列を挿入したノックインマウス（Nrf2KI/KI）を作製した．このマウスとの交配により，Nrf2KI/KI/p62-/-マウスを得た． 次に，全身でのp62とNrf2遺伝子二重欠損下において，組織特異的にNrf2の発現をレスキューするために，上記マウスと腸管特異的にCreリコンビナーゼを発現するVill-creマウスと交配した．これにより生まれる仔は，Creが発現する腸管でのみLoxPで挟まれた転写終結シグナルおよびpolyA付加シグナルが除去されるため，Nrf2の発現が腸管特異的にレスキューされた．
全身性DKOマウス，腸管上皮特異的Nrf2遺伝子レスキュ－マウスにおいて，各種表現型の解析を進捗させている．
Nrf2腸管特異的レスキューマウスについて解析を行った．経時的な体重測定を行い，体重増加は全身DKOマウスと大きな変化が認められなかった．肝NASH病態を病理組織学的に解析し，SAF scoreでスコア化した．Nrf2腸管特異的レスキューマウスでは，脂肪化スコア 0.40±0.24点，活動性（炎症）スコア 1.00±0.32，線維化スコア1.40±0.51点であり，全身DKOマウスと比較して脂肪化は軽度軽快傾向が見られたが，活動性，線維化については統計学的有意差は認められなかった．腸管透過性を評価するためFITC-デキストランを経口投与し，その後血中濃度を測定した．全身DKOマウス61.9±6.2 AUCに対し，Nrf2腸管特異的レスキューマウスでは47.5±13.0 AUCと低下（改善）傾向を認めたが有意な差は認められなかった．
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
作製したNrf2遺伝子腸管特異的レスキューマウスにおいて，予想されたNASH発症の抑制や腸管透過性亢進の改善などの表現型の変化が認められなかった．現在，作製されたマウスのゲノタイピングを実施している．
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| Strategy for Future Research Activity |
Nrf2遺伝子について，DKOマウスに腸管上皮細胞における細胞特異的遺伝子レスキュ－マウスを再度作製し， 本遺伝子レスキュ－マウスにおける表現型の変化について解析する．腸管上皮細胞特異的レスキューマウスと全身欠失マウスにおいて，NASHと肝発癌の頻度を比較し，肝発癌の抑止におけるNrf2の役割を解明していく．
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[Journal Article] Molecular targeting of HER2-overexpressing biliary tract cancer cells with trastuzumab emtansine, an antibody-cytotoxic drug conjugate.2019
Author(s)
Yamashita-Kashima Y, Yoshimura Y, Fujimura T, Shu S, Yanagisawa M, Yorozu K, Furugaki K, Higuchi R, Shoda J, Harada N
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Journal Title
Cancer Chemo Pharmacol
Volume: 83
Pages: 659-670
Peer Reviewed
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[Journal Article] Skeletal muscle mass to visceral fat area ratio is an important determinant affecting pathophysiology of NAFLD.2018
Author(s)
Shida T, Akiyama K, Oh S, Sawai A, Isobe T, Okamoto Y, Ishige K, Mizokami Y, Yamagata K, Onizawa K, Tanaka H, Iijima H, Shoda J
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Journal Title
J Gastroenterol
Volume: 53
Pages: 535-47
Peer Reviewed
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