ヒト癌浸潤におけるアダプター分子クラックの解析

2006 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 18013003
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 田中 伸哉 北海道大学, 大学院医学研究科, 助教授 (70261287)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 西原 広史 北海道大学, 大学院医学研究科, 助手 (50322805)
• Keywords: シグナル伝達 / アダプター / CRK / 細胞骨格 / G蛋白質

Research Abstract

【目的】CRKはSH2/SH3領域からなるアダプター分子であり、チロシンキナーゼから低分子量G蛋白を結ぶシグナルを伝達することが明らかとなっている。また、CRKは近年ヒトの悪性腫瘍においてその発現が増加していることが報告されており、癌の浸潤、転移に関与すると推測される。本研究ではCRKのシグナル伝達系の中で、特に細胞骨格の動きや細胞運動の制御に着目し、ヒト癌細胞の接着、浸潤におけるCRKの役割を明らかにすることを目的とした。
【研究成果】本年度は、卵巣癌(MCAS)、肉腫細胞株(Fuji, HS-SY-II, SYO-1)を用いてCRKをsiRNAで恒常的にノックダウンした細胞株を樹立した。4つの細胞株の何れにおいても、CRKIは完全に検出できず、CRKII発現が様々なレベルで減少した細胞株を3つ以上得ることが出来た。樹立細胞では細胞接着斑の数が減少し、アクチンストレスファイバーの形成も減少し、wound healing assayによる細胞運動能、colony形成能、in vivoでの造腫瘍能が低下することが判明した(Linghu, H.,et al.,Oncogene,25,2006;Watanabe, T.,et al.,Mol.Cancer Res.,7,2006)。またCRKの下流のシグナル伝達系の解析を行い、Dock180結合蛋白Elmo1がDock180のユビキチン化を制御することを見出し、局所でのRacの活性に関与することが示された(Makino, Y.,et al.,JCS,119,2006)。これらの結果から少なくともCRKは細胞株においては癌の悪性化に重要な働きをすることが示された。

Research Products

• [Journal Article] Elmol inhibits the ubiquitylation of Dock180 recruited onto plasma membrance. (2006)
  • Author(s): Makino, Y., Tsuda, M., Ichihara, S., Watanabe, T., Sakai, M., Sawa, H., Nagashima, K., Hatakeyama, S., Tanaka, S.
  • Journal Title: J. Cell Sci. 119 Pages: 923-932
• [Journal Article] A novel function of OLIG2 to suppress human glial tumor cell growth via p27Kip1 transactivation. (2006)
  • Author(s): Tabu, K., Ohnishi, A., Sunden, Y., Suzuki, T., Tsuda, M., Tanaka, S., Sakai, M., Nagashima, K., Sawa.H.
  • Journal Title: J, Cell Sci. 119 Pages: 1433-1441
• [Journal Article] IGF2 is critical for tumorigenesis by synovial sarcoma oncoprotein SYT-SSX1. (2006)
  • Author(s): Sun, Y., Gao, D., Liu, Y., Huang, J., Lessnick, S., Tanaka, S.
  • Journal Title: Oncogene 25 Pages: 1042-1052
• [Journal Article] Azathioprine suppresses ERM-dependent T cell-APC conjugation through inhibition of Vav guanosine exchange activity on Rac proteins. (2006)
  • Author(s): Poppe, D., Tiede, I., Fritz, G., Becker, C., Bartsch, B., Wirtz, S., Strand, D., Tanaka, S., Galle, PR., Bustelo, XR., Neurath, MF.
  • Journal Title: J. Immunol. 176 Pages: 640-651
• [Journal Article] Characterization and application of polyclonal antibodies that specifically recognize JC virus large T antigen. (2006)
  • Author(s): Sunden, Y., Suzuki, T., Orba, Y., Umemura, T., Asamoto, M., Nagashima, K., Tanaka, S., Sawa, H.
  • Journal Title: Acta Neuropathol. (Berl) 111 Pages: 379-387
• [Journal Article] Involvement of adaptor protein Crk in malignant feature of human ovarian cancer cell line MCAS. (2006)
  • Author(s): Linghu, H., Tsuda, M., Makino, Y., Sakai, M., Watanabe, T., Ichihara, S., Sawa, H., Nagashima, K., Mochizuki, N., Tanaka, S.
  • Journal Title: Oncogene 25 Pages: 3547-3556
• [Journal Article] Adaptor molecule Crk is required for sustained phosphorylation of Gabl and HGF-induced cell motility of human synovial sarcoma cell lines (2006)
  • Author(s): Wanatabe, T., Tsuda, M., Makino, Y., Ichihara, S., Sawa, H., Mochizuki, N., Nagashima, K., Tanaka, S.
  • Journal Title: Mol. Cancer Res. 7 Pages: 499-510